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          人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞;HL-60圖片

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          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-09 12:52:53瀏覽次數(shù):643

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞;HL-60圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細(xì)介紹

          人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞;HL-60圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
          細(xì)胞名稱 人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞;HL-60圖片
          形態(tài)特性  髓樣
          生長特性 懸浮
          特征特性  該細(xì)胞含有myc+致癌基因,受體表達(dá):補(bǔ)體Fc;致瘤性:陽性。 
          培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  20%FBS
          傳代方法  每2-3天換液一次,細(xì)胞接種密度為1E+05/ml,不要超過1E+06/ml。
          傳代情況 完成目錄中顯示細(xì)胞污染廢棄
          凍存條件 
          支原體檢測 
          STR 
          同工酶 
          染色體 
          使用權(quán)限 A類
          細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
          操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          RNA  Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )100g
          DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/BstN I50 次
          AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶200U
          微量 RNA 定量試劑盒1mL
          120905-200人淋巴細(xì)胞分離液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
          填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次
          L- 苯丙氨酸10g
          SDS-PAGE 分離膠配膠液500mL
          3120-0.1微量 RNA 助沉劑0.1mL
          130933-50FTA 血片 DNAout50 次
          預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g
          ABTS 溶液,7mM 50mL
          KM71 酵母菌種1mL
          12-212DH10Bac 菌種1mL
          硫酸鐵100g
          dNTP 溶液,100mM 0.5mL
          真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
          超氧化物歧化酶,人10ku人血清白蛋白 V500mg
          硝酸纖維素膜,13×20cm1張
          70908-100DNA PAGE 膠回收試劑盒100 次
          核糖核酸酶 HII250U
          1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌 )100 支
          自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動子 )200mL
          CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 K360100g
          12-254Stb14 菌種1mL
          M13 噬菌體單鏈基因組 DNAout50 次
          一管式拭子 DNAout20 次
          28重組蛋白(病毒)--
          脂質(zhì)氧化 (MDA) 檢測試劑盒100 次
          Hoechst33258 干粉10mg
          疊氮25g
          刀豆球蛋白 A Ⅲ50mg
          CAS57-33-0戊巴比妥5g
          17- μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌 )100 支
          大提柱式藻類 RNAout5次
          DTT,蛋白5g
          131032-100人基因組 DNA,女性100μg
          23-0110-100Camptothecin( 喜樹堿 )100μL
          120630-25Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL
          JM107 菌種1mL
          131236-250牛血清白蛋白封堵液250mL
          Rosetta-gami B(DE3) 菌種1mL
          非凍型拭子病毒保存液100mL
          CAS1523-11-1#NAME?5g
          60702-100RNase-free SDS 溶液 ,10%100mL
          石蠟包埋組織 RNAout30 次
          瓊脂糖100g

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