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詳細(xì)介紹
人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞；Jurkat CA圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞；Jurkat CA圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞產(chǎn)物為IL-2，轉(zhuǎn)入熒光素酶基因，T細(xì)胞受體，抗原表達(dá)CD3。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:11,12；D13S317:8,12；D16S539:11；D18S51:13,20；D21S11:32.2,34.2；D3S1358:16；D5S818:9；D7S820:8,12；D8S1179:13,14；FGA:20,21；PentaD:11,13；PentaE:10,12；TH01:6,9.3；TPOX:8,10；vWA:18
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
柱式醬油 DNAout10 次
凝血酶1000U
TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
CAS147-94-4β-D- 阿糖胞苷50mg
壯觀霉素溶液 ,50mg/mL10mL
Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )50mg
高 GC 革氏陽性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次
脂蛋白 PAGE 染液1套
CAS77-86-1三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷100g
80101-50一管式病毒 DNA-RNAout50 次
二甲基酸5g
DNA Shuffling 試劑盒10 次
21-0320-5 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長因子5mL
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）50 次
醛基磁珠2mL
抗氟離子酸性磷酸酶檢測試劑盒120 次
Golgi-Tracker Red( 高爾基體紅色熒光探針 )1mg
130612-500Bst DNA 聚合酶，全長500U人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
廣譜彩虹預(yù)染蛋白Marker100次國產(chǎn)
RKO-AS45-1(人結(jié)腸轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HCC38(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BPL瓊脂/BPL Agar食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
馬鈴薯葡萄糖肉湯/Potato Dextrose Broth250克國產(chǎn)/進(jìn)口
HHCC(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
胰腺腺泡細(xì)胞英文名稱：MPC-83
人腺細(xì)胞英文名稱：LCC1
大鼠腦膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Calu-3(人肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SCHAEDLER瓊脂/SCHAEDLER厭氧菌瓊脂/SCHAEDLER Agar厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
十六烷基*基溴化銨瓊脂/假單胞菌屬選擇瓊脂/Cetrimide Agar用于綠膿桿菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
T84(人結(jié)腸腺肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠黑色素瘤細(xì)胞英文名稱：B16
人喉表細(xì)胞英文名稱：Hep-2
TRX標(biāo)簽蛋白裂解液100ug20μg、100μg
L6(大鼠成肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(29:1)200ml國產(chǎn)
Y1090 菌種1mL
磷酸二酯酶Ⅰ100U
0.5mLDNA 離心超濾管 (300-500 KD)1個(gè)
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