詳細(xì)介紹
人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 上皮樣;圓形、成團(tuán)
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系由Lasfargues E和 Coutinho WG建立,源于一名60歲患有浸潤(rùn)性乳腺導(dǎo)管癌的白人女性的實(shí)體瘤。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 新生牛血清,10%;10ug/ml 人重組insulin
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:13,18;D21S11:28,32.2;D3S1358:17;D5S818:11,13;D7S820:9,12;D8S1179:10,12;FGA:22,25;PentaD:9,14;PentaE:5;TH01:7;TPOX:8;vWA:15,16
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
乳酸脫氫酶測(cè)試盒24 T
碘硝基四唑紫嘌呤250mg
ABTS 溶液,7mM 50mL
100806-100Earle 溶液100mL
SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 )25mg
鹽酸萬(wàn)古霉素100mg
DNA Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )100g
CAS9002-13-5脲酶 ( 尿素酶 巨豆 )20Ku
18-0590-48維生素 C 測(cè)試盒48 T
纖維蛋白原100mg
丁酰膽堿酯酶500U
血液保存和 DNA 純化套裝100 次大鼠骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒規(guī)格:500次gersion
BT-20(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
UBA培養(yǎng)基/UBA Medium啤酒中厭氧菌檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂/Dulcitol Semisolid Agar細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗(yàn)10克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝細(xì)胞英文名稱(chēng):H22
人肺腺細(xì)胞(胸膜滲出液)英文名稱(chēng):Calu-3
T/G HA-VSMC(人血管平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
吳茱萸堿規(guī)格:1g/支;98%
枸櫞酸鹽培養(yǎng)基/檸檬酸鹽培養(yǎng)基/Citrate Agar大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的鑒別250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EAC(小鼠艾氏腹水細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
非洲綠猴SV40 轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞英文名稱(chēng):COS-7
QGY-7701, 人肝細(xì)胞gersion
GoldCassette-HIS/HIS重組標(biāo)簽蛋白快速檢測(cè)試劑盒(精裝)2次2次、10次
EF-18瓊脂/EF-18 Agar濾膜法檢測(cè)食品中沙門(mén)氏菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SK-MES-1(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SW626(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
LLC-WRC 256(大鼠腹水細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
130808-1顯影粉1袋
甲基纖維素25g
非酶多糖清除劑 (DNA )50 次
C43(DE3) 菌種1mL
小鼠抗 S1 標(biāo)簽單抗100μL
60208-10硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )10g