Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-573說明書采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-573說明書現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱	Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-573說明書
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。動(dòng)物 DNAout250mL
DNA 稀釋液10mL
120403-300蝦堿性磷酸酶300U
100409-56nt 隨機(jī)引物，0.5μg/μL5μg
Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )100mL
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )250 T
戊巴比妥5g
Lillie 甲醛中性固定液250 mL
CAS73-22-3L- 色氨酸5g
19-0060-100 F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
60306-200柱式血液 DNAout200 次
氫化可5g
D- 生物素 ( 維生素 H)1g
質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg
增強(qiáng)型天狼猩紅染色試劑盒100mL
18-0610-24一氧化氮合成酶測(cè)試盒24 T
81104-1000超快核酸銀染試劑盒1000mL
神經(jīng)氨酸酶 ( 梭菌 )4mg
DNA 堿性膠上樣液 ,6×10mL
Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Western中低分子量蛋白Marker20次國(guó)產(chǎn)
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14)5×106cells/瓶×2
A875(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
膽鹽七葉苷瓊脂/Bile Esculin Agar腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
液體沙氏培養(yǎng)基/沙堡氏4%葡萄糖瓊脂肉湯/薩布羅氏葡萄糖瓊脂肉湯/SDB霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
L1210(小鼠白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
兔IgG-兔IgG5 x 1ml國(guó)產(chǎn)
麥角甾苷規(guī)格：20mg/支；98%
Sf-21(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Hepa 1-6(小鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠氣管和支氣管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
L-Glutamine規(guī)格：100g
人膀胱細(xì)胞英文名稱：EJ
煌綠增菌液/亮綠增菌液/亮綠肉湯/Brilltant Green Enrichment Broth蛋與蛋制品中沙門氏菌檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
0.5M Tris-Cl(pH6.8)500ml國(guó)產(chǎn)
293T/胚腎細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
腺英文名稱：MA891瘤
克必隆 eTS miRNA RT-PCR 試劑盒10 次
130644-500甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶500U