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Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-546說明書現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-546說明書 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,13;D12S391:17,18;D13S317:13,13;D16S539:12,12;D18S51:11,16;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2;D2S1338:20,21;D3S1358:16,16;D5S818:12,12;D6S1043:18,18;D7S820:8,9;D8S1179:13,13;FGA:22,23;Penta E:11,11;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。柱式凍存血液 DNAout50 次
18-0160-25超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+Mg2+ATPase)25 T
101213-100DNA GuSCN( 異硫氰酸胍 )100g
SUMO 蛋白酶5μg
DNA 電泳分子量標準 (3)pBR322/BstN I50 次
柱式血液 RNAout50 次
Stb12 菌種1mL
121103-250熱啟動 Tth DNA 聚合酶250U
90506-50膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒50 次
酸性磷酸酶1g
大提柱式植物 RNAout5次
SDS-PAGE 上樣液,5×10mL
β-Tubulin 小鼠單抗1000μL
131228-500Tth 核酸內(nèi)切酶 IV500U
90302-5MgCl2溶液,25mM,PCR 5mL
陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)1個
ECL 法生物素雜交檢測試劑盒5次
大提柱式 DNA 清除劑5次tert-Butyl hydroperoxide過氧化氫叔丁醇75-91-2
TRIFLUOROMETHANESULFONAMIDE三磺酰胺421-85-2
Oxazole-2-amine2-氨基惡唑4570-45-0
2,5,6-TRIMETHYLBENZOXAZOLE2,5,6-三基并唑19219-98-8
Calconcarboxylic acid鈣試劑羧酸3737-95-9
Litmus paper blue藍石蕊試紙
LEAD(II) SULFIDE硫化鉛1314-87-0
2-Bromo-5-fluorobenzyl bromide2-溴-5-溴芐112399-50-5
NA天然龍腦
cis-3-Hexenyl phenylacetate乙酸葉醇酯42436-07-7
Isoprocarb異丙威2631-40-5
Dichloromethane二烷1975/9/2
SUCCINALDEHYDIC ACID琥珀半 溶液692-29-5
Trimethyl phosphate磷酸三酯512-56-1
Ethinamide乙硫異煙胺536-33-4
NA植物油酸
1-Diazo-2-naphthol-4-sulfonic acid1-重氮-2-萘酚-4-磺酸887-76-3
Ingrain Blue 1阿爾新藍 8GX33864-99-2
Ruthenium acetylacetonate乙酰丙釕(III)14284-93-6
2-Bromoaniline2-溴胺615-36-1
2-Chloroethyl ethyl ether1--2-乙氧基乙烷628-34-2
Benzoyleneurea2,4-喹唑啉二86-96-4
DPX-T5648嘧磺隆74222-97-2
單細胞裂解液 (DNA)1mL
27重組蛋白(非病毒)--
131128A-100動物種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
X 光片 (5×7 英寸 )1盒