詳細介紹
人膠質瘤細胞;GOS-3圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人膠質瘤細胞;GOS-3圖片
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 由U-343MG衍生而來
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS + 4mM L-Glu
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y; CSF1PO:10,12; D13S317:9,13; D16S539:9,12; D18S51:23; D19S433:11.2,13,14; D21S11:31,33.2; D2S1338:22,24; D3S1358:15,17; D5S818:12,13; D7S820:9,11; D8S1179:13,14; FGA:19,20; TH01:6,9.3; TPOX:8,9; vWA:17,18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
140623-20雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP·PI)20 次
90602D-50DNA 電泳分子量標準 (3)λDNA/EcoR I50 次
濕潤劑 P-40100mL
丁酰膽堿酯酶500U
溴甲酚紫5g
DNA HEPES( 羥乙基乙硫磺酸 )100g
CAS103476-89-7亮抑酶肽2mg
130537-10鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,10mg/mL10mL
柱式海洋動物 DNAout50 次
MMLV 逆轉錄酶10000U
ApaI2000U
微量 DNA 助沉劑0.1mL
柱式探針純化試劑盒10 次
130552-500堿性磷酸酶,偶聯(lián)500U
131042-25miRNA 熒光定量檢測試劑盒25 次
Vinblastine( 長春新堿 )100μL
果膠酶100mgTETRAETHYLSILANE四乙基硅烷631-36-7
C.I. Solvent Yellow 90溶劑黃90
AMENTOFLAVONE穗花杉雙黃1617-53-4
ACID GREEN 3酸性綠34680-78-8
NA水質氮氧化物(水劑)標樣
NA水質總磷標樣
4-Bromophthalimide4-溴鄰二酰亞胺6941-75-9
Epmedin B羊藿定 B110623-73-9
Loperamide hydrochloride酸洛丁胺34552-83-5
NICKEL(II) SULFATE HEPTAHYDRATE硫酸鎳10101-98-1
Bis[2-(2-benzothiazoly)phenolato]zinc(II)雙[2-(2-并噻唑基)酚]鋅58280-31-2
NA卟啉顯色劑
Hypericin金絲桃素548-04-9
Ethyl methyl carbonate碳酸乙酯623-53-0
2,5-Dimethyl-3-hexyne-2,5-diol2,5-二基-3-己炔-2,5-二醇142-30-3
Isobutyl iodide碘代異丁烷513-38-2
Hexafluorozirconic acid六鋯酸12021-95-3
Isobutyl isobutyrate異丁酸異丁酯97-85-8
3-Amino-4-chlorobenzamide3-氨基-4-酰胺19694-10-1
YTTRIUM NITRATE HEXAHYDRATE酸釔13494-98-9
Molybdenyl acetylacetonate乙酰丙鉬17524-05-9
FLUORIDE STANDARD離子(F-)標準溶液16984-48-8
D-(+)-TURANOSED(+)-松二糖547-25-1
L- 胱氨酸25g
牛血清白蛋白封堵液250mL
CAS25988-63-0多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬 )25mg
130527-1哺乳動物蛋白酶抑制劑1mL