詳細(xì)介紹
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-RFP*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-RFP*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 RFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
CAS13453-07-1氯化金1g
120683-1羧芐青霉素溶液 ,50mg/mL1mL
乙醇脫氫酶1.5ku
酵母產(chǎn)孢培養(yǎng)基100mL
碘5g
Sulfolobus DNA 聚合酶 IV100U
CAS1476-53-5新生霉素250mg
130589-100小鼠抗 Tag-100 標(biāo)簽蛋白單抗100μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次
L- 山梨糖5g
L- 山梨糖5g
PCNA 小鼠單抗1000 μL
CAS26628-22-8疊氮25g
81205-30一站式 Tricine-SDS-PAGE 套裝30 次
轉(zhuǎn) Lectin 基因植物 PCR Mix100 次
卵磷脂 ( 大豆 )25g
離析酶 R-101g6-Aminoquinoline6-氨基喹啉580-15-4
4'-Methoxyresveratrol白藜蘆醇-4'-33626-08-3
Oxindole2-吲哚59-48-3
ALLURA RED AC誘紅25956-17-6
Hemin化血紅素16009-13-5
5-Acetylsalicylamide5-乙?;畻铛0?0187-51-7
Nitroterephthalic acid2-基對(duì)二酸610-29-7
9-Chloroacridine9-吖啶1207-69-8
L-Arginine ethyl ester dihydrochlorideL-精氨酸乙酯酸36589-29-4
Mesitylene1,3,5-三108-67-8
N-(3-Aminopropyl)-imidazole1-(3-氨基丙基)咪唑5036-48-6
Isopropenylboronic acid pinacol ester異丙基酸頻哪醇酯126726-62-3
2-Phenylacetophenone二乙451-40-1
Acid Yellow 23肼黃1934-21-0
Aluminum diacetate hydroxide式乙酸鋁142-03-0
Diphenyldimethoxysilane二基二氧基硅烷6843-66-9
1-Acetyl-2-imidazolidinoneN-乙酰基-2-咪唑烷5391-39-9
3-CHLORO-4-HYDROXYBENZOIC ACID3--4-羥基酸半,水合3964-58-7
N'-Cbz-L-ornithineN'-Cbz-L-鳥氨酸3304-51-6
1-UNDECANETHIOL1-十一(烷)硫醇5332-52-5
N-OCTYLTRICHLOROSILANE基三硅烷5283-66-9
2-Fluoro-4-(trifluoromethyl)aniline2--4-三基胺69409-98-9
9-methoxycamptothecin9-氧基喜樹19685-10-0
DEOXYRIBONUCLEIC ACID, GENOMIC小牛胸腺DNA91080-16-9
超微量 ATP 酶測(cè)試盒 ( 測(cè) Ca2+ATPase)25 T
CAS9001-18-7心肌黃酶1KU
131154-0.1山羊抗小鼠 IgG,熒光素 488 標(biāo)記0.1mg
131176-30免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒30 次
N- 乙酰 -L- 半胱氨酸5g