詳細介紹
人結(jié)直腸腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人結(jié)直腸腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]圖片
形態(tài)特性 實體瘤
生長特性 體內(nèi)生長
特征特性 利用培養(yǎng)的該細胞系進行裸鼠體內(nèi)移植,形成實體瘤,凍存;可用于建立人結(jié)直腸癌的體內(nèi)移植模型。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細胞懸液接種至免疫缺陷小鼠。
傳代情況 P1
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權(quán)限 A類
人結(jié)直腸腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人結(jié)直腸腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]圖片質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人結(jié)直腸腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
XL-10 gold 菌種1mL
甘油醛 -3- 磷酸脫氫酶500UN
β-D- 阿糖胞苷50mg
木材 DNAout50 次
CAS11028-71-0刀豆球蛋白 A Ⅲ50mg
12-25BL21(DE3)菌種1mL
血液 DNAout150 次
色素細胞生長因子5mL
彈性蛋白酶 ( 豬胰 )25mg
牛血清白蛋白標準品,2mg/mL1mL
CAS150399-99-8D- 葡萄糖 -1- 磷酸二1g
100827B-10菌種保存液10 管
伊紅 Y, 醇溶性10g
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B100mL
2,6- 二氯酚靛酚1g
山羊抗小鼠 IgG,熒光素 555 標記0.1mg
CAS1064-48-8氨基 10B5g
130578-1000小鼠抗 V5 標簽單抗1000μL
植物 RNAout250 次
L- 谷胱甘肽 ( 氧化型 )1g2-Naphthyl benzoate酸萘酚酯93-44-7
Nodakenin紫花前胡苷495-31-8
2-(4-Iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-phenyltetrazolium chloride碘基四唑紫146-68-9
1-Hexanethiol1-己硫醇111-31-9
Phenyltrimethoxysilane基三氧基硅烷2996-92-1
2-(4-Diethylamino-2-hydroxybenzoyl)benzoic acid4-二乙氨基酸5809-23-4
CaulophyllineN-基野靛486-86-2
3-(N,N-Dimethylmyristylammonio)propanesulfonate3-磺丙基十四烷基二甜菜14933-09-6
1,4-Dimethoxybenzene對二150-78-7
Lithium hydroxide氫氧化鋰1310-66-3
5-METHYLCYTIDINE5-基胞苷2140-61-6
Sesamin芝麻素607-80-7
2-Bromobutyric acid methyl ester2-溴丁酸酯3196-15-4
BOC-L-LEUCINOLN-叔丁氧羰基-L-亮氨醇82010-31-9
ZINC DIHYDROGEN PHOSPHATE磷酸二氫鋅13598-37-3
5'-DEOXY-S-ADENOSYL-L-HOMOCYSTEINES-(5'-腺苷)-L-高半胱氨酸979-92-0
人結(jié)直腸腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]圖片LIQUIRITIN(SH)甘草苷551-15-5
Trimethylolpropane triacrylate三羥基丙烷三丙酸酯15625-89-5
STRONTIUM OXIDE氧化鍶1314-11-0
1,4-Diiodobenzene1,4-二碘624-38-4
Tetrahydropapaverine hydrochloride四氫酸6429/4/5
Methyl D-alaninate hydrochlorideD-丙氨酸酯酸14316-06-4