人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細胞株；PC-3M-2B4圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細胞株；PC-3M-2B4圖片
形態(tài)特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  母系PC-3M，單細胞克隆法分離鑒定的低轉(zhuǎn)移亞系；裸鼠體內(nèi)成瘤率87.5%，不轉(zhuǎn)移。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3~1:6傳代；2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：14，15；D19S433：14；D21S11：29，31.2；D2S1338：18，20；D3S1358：16，20；D5S818：13；D7S820：8，11；D8S1179：13；FGA：24，25；TH01：6，7；TPOX：8，9；vWA：17；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

130868-1二硫鍵異構(gòu)酶，人1mg
130815-250Taq 酶抗體250U
土霉素鹽酸鹽溶液 ,100mg/mL10mL
F12K 液體培養(yǎng)基 ( 無血清和雙抗 )500mL
N,N- 雙 (2- 羥乙基 )-3- 氨基乙磺酸5g
MgSO4溶液，10mM，PCR 5mL
CAS59-05-2氨甲喋呤10mg
131131B-100真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
細菌 RNAout250 次
庚烷磺酸1g
1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯1g
柱式病毒 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
CAS39455-31-7DEAE 葡聚糖凝膠 A-5025g
12-242K802 菌種1mL
鹽酸胍溶液，8M200mL
Indo-1 AM1mg
胸嘧啶核苷5gTABERSONINE它勃4429-63-4
10 G METHYL JASMONATEPURE茉莉酸酯39924-52-2
Monoethyl Adipate己二酸單乙酯626-86-8
Dibutyltin maleate二丁基馬來酸錫1978/4/6
DIFORMYLIMIDE SODIUM SALT二酰氨基18197-26-7
5-Bromo-2-fluorobenzonitrile5-溴-2-179897-89-3
Potassium methoxide醇鉀865-33-8
DL-HomoserineDL-高絲氨酸1927-25-9
2-Fluoro-4-nitrotoluene2--4-基1427-07-2
4-NITROPHENYL-N-ACETYL-BETA-D-GLUCOSAMINIDE4-基基-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷3459-18-5
SINIGRIN MONOHYDRATE介子苷64550-88-5
beta-Diphosphopyridine nucleotide煙酰胺腺嘌呤雙核苷酸53-84-9
Cyclobutylamine環(huán)丁基胺2516-34-9
NAtris 乙酸
1-Boc-4-(aminomethyl)piperidine4-氨基基-1-Boc-啶144222-22-0
(5E,9E)-6,10,14-Trimethylpentadeca-5,9,13-trien-2-one法尼基丙1117-52-8
2-Bromo-2-methylpropionic acid2-溴代異丁酸2052/1/9
N-AcetylethylenediamineN-乙?；?001-53-2
Twofold Lactose Bile Salt Broth雙料乳糖膽胨水
CALCIUM PYROPHOSPHATE焦磷酸鈣7790-76-3
CHLOROXURON枯草隆1982-47-4
Abscisic acid脫落酸14375-45-2
CHLOROFORM-D氘代仿-d865-49-6
生物素化的 β- 半乳糖苷酶100U
CAS9025-56-3半纖維素酶15ku
100838-100遺傳霉素 (G418) 干粉100mg