詳細(xì)介紹
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱 人
形態(tài)特性 球形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞由Oettgen F及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進(jìn)展性惡性黑色素瘤的白人男性患者的胸導(dǎo)管中分離建立的。該細(xì)胞可產(chǎn)生黑色素,電鏡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關(guān)。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了針對(duì)該細(xì)胞系的抗體。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1×105~2×105,每周補(bǔ)液2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:13,16;D19S433:15,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,23;D3S1358:14,16;D5S818:12,13;D7S820:12;D8S1179:16;FGA:18,20;TH01:6;TPOX:11;vWA:16,17;
同工酶
染色體 53~73,XY
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
AM(人腺樣囊性細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移))5×106cells/瓶×2
Lysozyme Antibody/溶菌酶100mg國產(chǎn)
HuH-7(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HCT-8/結(jié)腸細(xì)胞株國產(chǎn)
中分子量單一蛋白Marker(66 kD)50次國產(chǎn)
CCD-1095Sk(人腺浸潤性導(dǎo)管旁膚細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:B16
麥迪、麥白霉素檢定培養(yǎng)基/Medecamycin Medium250克國產(chǎn)/進(jìn)口
KB(人口腔表樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人前列腺平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝竇內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLDiethyl pyrocarbonate焦碳酸二乙酯1609-47-8
4-(N,N-Diethyl)-2-methyl-p-phenylenediamine monohydrochloride對(duì)氨基二乙基胺酸2051-79-8
Dimethyl sulfide硫75-18-3
Thionyl chloride化亞砜7719/9/7
METHYL 10-UNDECENOATE10-十一酸酯111-81-9
SAMARIUM釤標(biāo)準(zhǔn)溶液7440-19-9
Methyl(triphenyl)phosphonium chloride乙基三基化膦896-33-3
NA水相肟
Sodium lauroylsarcosinateN-月桂酰肌氨酸137-16-6
2-Chloro-4,6-dinitroaniline6--2,4-二基胺3531-19-9
NAPfu DNA 聚合酶
N-(9-Fluorenylmethoxycarbonyloxy)succinimide9-芴基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯82911-69-1
NA金黃偶氮染料Y
1,1,1-TRIFLUORO-2-BUTANONE1,1,1-三-2-丁381-88-4
3-methoxy-4-(3-methoxypropoxy)benzaldehyde3-氧基-4-(3-氧基丙氧基)946670-72-0
2-Amino-3,5-dibromopyrazine2-氨基-3,5-二溴吡嗪24241-18-7
N-Ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroquinoline2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氫喹啉16357-59-8
METHOXYACETIC ANHYDRIDE氧基乙酸酐
4-ALLYLOXY-2-HYDROXYBENZOPHENONE4-丙氧基-2-羥基二2549-87-3
L-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochlorideL-谷氨酸-5-叔丁酯-1-酯酸6234/1/1
2,4,6-Trimethylbenzyl alcohol2,4,6-三基芐醇4170-90-5
Quinhydrone醌氫醌106-34-3
2-CHLOROSULFONYL-PYRIDINIUM, CHLORIDE吡啶-2-磺酰酸111480-84-3
2'-Methylacetophenone鄰基乙577-16-2
Fmoc-D-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-D-酪氨酸118488-18-9
丹參酮IIA規(guī)格:1g/支;98%
人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:MuM-2C
Half Fraser添加劑/Half Fraser Supplement添加到HB4190中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)10毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
人胚腎細(xì)胞英文名稱:AAV-293
YM11瓊脂/YM11 Agar濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人非小細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H1650
酵母粉瓊脂/酵母提取物瓊脂/Yeast Extract Agar水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL