詳細(xì)介紹
人乳腺癌細(xì)胞;MCF 7B圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人乳腺癌細(xì)胞;MCF 7B圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞為MCF-7細(xì)胞的一個(gè)亞克隆,表達(dá)高水平的褪黑素MT1受體的mRNA,對(duì)褪黑素有一定的敏感性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:14;D19S433:13,14;D21S11:30;D2S1338:21,23;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8,9;D8S1179:10,14;FGA:23,25;TH01:6;TPOX:9,12;vWA:14,15;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
葛根素規(guī)格: 20mg/支;98%
SK-OV-3(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
TE-1(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
QG-56(人肺扁平上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
BT-20(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2gersion5'-O-Dimethoxytrityl-deoxythymidine5'-O-[雙(4-氧基基)芐基]-2'-胸腺嘧啶核苷40615-39-2
4-Fluorobenzyl bromide4-溴芐459-46-1
5-Methyluridine5-基尿苷1463-10-1
DL-Asparagine monohydrateDL-天冬酰胺,一水3130-87-8
NA棕櫚酸季四酯
Sodium butanoate丁酸156-54-7
UNDECYL DODECYL PHTHALATE鄰二酸二異十三(烷基)酯68515-47-9
3-AMINOPROPIONITRILE FUMARATE3-延胡素酸氨基酯2079-89-2
2-Ethoxybenzoyl chloride鄰乙氧基酰42926-52-3
NA408有機(jī)擔(dān)體
Sodium iodide碘化7681-82-5
Fmoc-THr(Bzl)-OH芴氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸117872-75-0
2-HYDROXYCINNAMIC ACID反式-2-羥基肉桂酸614-60-8
N,N-DimethylcyclohexylamineN,N-二基環(huán)己胺98-94-2
N-(1-Ethylpropyl)-3,4-dimethylanilineN-(1-乙基丙基)-3,4-二基胺56038-89-2
DIBENZYLIDENEACETONE聯(lián)基乙35225-79-7
N-ACETYLLACTOSAMINEN -乙酰- D- 乳糖胺32181-59-2
[1,1'-Bis(diphenylphosphino)ferrocene]dichloropalladium(II)[1,1'-雙(二基膦基)二茂鐵]二化鈀72287-26-4
1,3-Bis(aminomethyl)benzene1,3-1477-55-0
PK-15(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Caki-1(人腎透明細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Endogenous Enzymes Blocking Buffer/內(nèi)源性過(guò)氧化物酶封閉液10ml國(guó)產(chǎn)
小鼠腎上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
16-F1(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性英文名稱:NFS-60
1% NaC1甘露糖發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MiddleBrook 7H11瓊脂/MiddleBrook 7H11 Agar分枝桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL