詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
艾格瓊脂/Eugonic Agar過(guò)程中無(wú)菌監(jiān)測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人低分化前胃細(xì)胞英文名稱(chēng):BGC-823
結(jié)核冷染液70毫升×3國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠心肌成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
七葉苷培養(yǎng)基/Esculin Medium生化實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基,用于細(xì)菌七葉苷水解試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):BHK-21 [C-13]
亞硫酸鐵瓊脂/Sulfite Iron Agar用于厭氧亞硫酸鹽還原桿菌的平板計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SiHa(人子宮頸鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2YC-1 (10 mg)5-[1-(phenylmethyl)-1H-indazol-3-yl]-2-furanmethanol; YC-1
Sulpho NONOate (25 mg)disodium (E)-1-sulfonatodiazen-1-ium-1,2-diolate; Sulpho NONOate
Carbaprostacyclin methyl ester (500 ug)6,9α-methylene-11α,15S-dihydroxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; Carbaprostacyclin methyl ester
S-Adenosylhomocysteine-d4 (500 ug)S-(5’-deoxyadenosin-5’-yl)-L-homocysteine-d4; SAH-d4; S-Adenosylhomocysteine-d4
Palmitoyl Serotonin (5 mg)N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-hexadec*; Palmitoyl Serotonin
3-Deazaadenosine (10 mg)1-β-D-ribofuranosyl-1H-Imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine; deaza-Ado|DZA|c3Ado; 3-Deazaadenosine
Vigabatrin (50 mg)4-amino-5-hexenoic acid; Sabril
JWH 398 6-chloronaphthyl isomer (5 mg)(6-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 398 6-chloronaphthyl isomer
JWH 210 5-ethylnaphthyl isomer (10 mg)(5-ethylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 210 5-ethylnaphthyl isomer
bk-MDDMA (hydrochloride) (50 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(dimethylamino)-1-propanone, monohydrochloride; Dimethylone; bk-MDDMA (hydrochloride)
3,4-Methylenedioxy-N-benzylcathinone (hydrochloride) (50 mg)1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-2-(benzylamino)propan-1-one, monohydrochloride; BMDP; 3,4-Methylenedioxy-N-benzylcathinone (hydrochloride)
Eicosapentaenoic Acid (peroxide free) (250 mg)5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; EPA (peroxide free)|Timnodonic Acid (peroxide free); Eicosapentaenoic Acid (peroxide free)
Olvanil (50 mg)N-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-9Z-octadecenamide; N-Vanillyloleamide|NE 1955Olvanil
5(S),6(R)-Lipoxin A4 (25 ug)5S,6R,15S-trihydroxy-7E,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),6(R),15(S)-TriHETE|5(S),6(R)-LXA4; 5(S),6(R)-Lipoxin A4
Apocynin (5 g)1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-ethanone; Acetovanillone|Acetoguaiacone|NSC 2146|NSC 209524; Apocynin
Ni-Agarose Resin for 6x His-Tagged ProteinsNi瓊脂糖凝膠100ml國(guó)產(chǎn)gersion
BC-021(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜細(xì)胞系
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞英文名稱(chēng):CHL