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詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0904價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0904價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一無(wú)精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂/結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊脂/VRBDA腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人鼻咽母系細(xì)胞英文名稱：CNE-2Z
抗生素Ⅷ號(hào)培養(yǎng)基/抗生素8號(hào)培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.8去甲萬(wàn)古霉素的效價(jià)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎小管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
去氧膽酸鹽瓊脂/脫氧膽酸鈉瓊脂/DCLA大腸菌群的平板測(cè)定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)100ml、500ml100ml、500ml
胰蛋白胨膽鹽瓊脂/Tryptone Bile Agar大腸桿菌的膜過(guò)濾法選擇性培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
S180/小鼠腹水瘤株國(guó)產(chǎn)
KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))5×106cells/瓶×2
NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
U-2 OS(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Lane Marker Loading Buffer(5x)/蛋白示蹤上樣緩沖液(非還原，5x)5ml5ml
Hela(人宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×22C-T-2 （hydrochloride） （10 mg）4-（ethylthio）-2，5-dimethoxy-benzeneethanamine， monohydrochloride； 2，5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine； 2C-T-2 （hydrochloride）
Prostaglandin B3 （50 ug）9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z，8（12），13E，17Z-tetraen-1-oic acid； PGB3； Prostaglandin B3
SR 3335 （5 mg）N-[4-[2，2，2-trifluoro-1-hydroxy-1-（trifluoromethyl）ethyl]phenyl]-2-thiophenesulfonamide； ML 176； SR 3335
Pterostilbene （50 mg）4-[（1E）-2-（3，5-dimethoxyphenyl）ethenyl）-phenol； 3’，5’-Dimethoxy-4-Stilbenol|trans-3，5-Dimethoxy-4’-Hydroxystilbene； Pterostilbene
2-（2-pyridyl）-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylic Acid （1 g）4-methyl-2-（2-pyridinyl）-5-thiazolecarboxylic acid； 2-（2-pyridyl）-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylic Acid
N-tridecanoyl-L-Homoserine lactone （10 mg）N-[（3S）-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-tridec*； C13-HSL； N-tridecanoyl-L-Homoserine lactone
CAY10603 （1 mg）N-[4-[3-[[[7-（hydroxyamino）-7-oxoheptyl]amino]carbonyl]-5-isoxazolyl]phenyl]-1，1-dimethylethyl ester， carbamic acid； CAY10603
NSC 23766 （hydrochloride） （5 mg）N6-[2-[[4-（diethylamino）-1-methylbutyl]amino]-6-methyl-4-pyrimidinyl]-2-methyl-4，6-quinolinediamine， trihydrochloride； NSC 23766 （hydrochloride）
2，4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid （500 mg）2，4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid； 2，4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid
FK-866 （50 mg）N-[4-（1-benzoyl-4-piperidinyl）butyl]-3-（3-pyridinyl）-2E-propenamide； K 22。175； FK-866
CGP 57380 （5 mg）N3-（4-fluorophenyl）-1H-pyrazolo[3，4-d]pyrimidine-3，4-diamine； MNK1 Inhibitor； CGP 57380
CAY10608 （5 mg）N-[4-[（2S）-3-[[2-（3，4-dichlorophenyl）ethyl]amino]-2-hydroxypropoxy]phenyl]-methanesulfonamide； CAY10608
改良淋病奈瑟菌選擇性瓊脂平板10塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
人真微血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
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