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          EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族);HYL圖片

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          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-05 10:00:27瀏覽次數(shù):434

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          EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族);HYL圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細(xì)介紹

          EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族);HYL圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
          細(xì)胞名稱(chēng) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族);HYL圖片
          形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
          生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
          特征特性  該細(xì)胞來(lái)源于一彝族女性的外周血。1994年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
          培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
          傳代方法  1:2傳代;5-6天一次
          傳代情況 P5
          凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
          支原體檢測(cè) 熒光法(-)
          STR  -
          同工酶 
          染色體 
          使用權(quán)限 A類(lèi)
          細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
          操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          2玉米蛋白    25g
          玉米素    5mg
          預(yù)混型 BCIP/NBT 溶液    100mL
          預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)    100g
          預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)    100g
          預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (14.4-97.4KD)    10 次
          預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (43.0-200.0 KD)    10 次
          預(yù)稀釋 BGG 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品    7×1mL
          預(yù)稀釋 BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品    7×1mL
          原釩酸鈉,十二水    25g
          Zamboni 固定液    250 mL
          Zenker 固定液    250 mLterone EIA Antiserum
          Latanoprost EIA Antiserum (100 dtn)Latanoprost EIA Antiserum
          Vilogenin (Atlantic salmon) Standard (50 ug)Vilogenin (Atlantic salmon) Standard
          9(S)-HpODE (1 mg)9S-hydroperoxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(S)-HpODE
          Aldehyde Site Assay Reactive Probe (120 uL)Aldehyde Site Assay Reactive Probe
          Laemmli Buffer Stock Solution (2X) (10 mL)Laemmli Buffer Stock Solution (2X)
          Dihomo-γ-Linolenoyl PAF C-16 (1 mg)1-O-hexadecyl-2-O-(8Z,11Z,14Z-eicosatrienoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 1-O-hexadecyl-2-dihomo-γ-Linolenoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine; Dihomo-γ-Linolenoyl PAF C-16
          2-Arachidonoyl Glycerol (1 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glyceryl ester; 2-AG; 2-Arachidonoyl Glycerol
          1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol (10 mg)1-O-9Z-octadecenoyl-2-O-acetyl-sn-glycerol; OAG; 1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol
          Xestospongin C (250 ug)[1R-(1R,4aR,11R,12aS,13S,16aS,23R,24aS)]-eicosahydro-5H,17H-1,23:11,13-diethano-2H,14H-[1,11]dioxacycloeicosino[2,3-b:12,13-b1]dipyridine; XeC|Araguspongine E; Xestospongin C
          G6PDH Cofactor (1 ea)G6PDH Cofactor
          SPHK Assay Fluorometric Detector (1 ea)SPHK Fluorometric Detector; SPHK Assay Fluorometric Detector
          β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase (1 ea)β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase
          Zetterqvist 固定液    250 mL
          Zinquin 乙酯    5mg
          Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)    1mg
          雜交袋    20 個(gè)
          雜交管 (35×100mm)    1個(gè)
          雜交管 (35×200mm)    1個(gè)

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