SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；PUMC-HUVEC-T1說(shuō)明書(shū)采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；PUMC-HUVEC-T1說(shuō)明書(shū)現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

產(chǎn)品名稱	SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；PUMC-HUVEC-T1說(shuō)明書(shū)
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  PUMC-HUVEC-T1形態(tài)呈現(xiàn)為典型的鵝卵石樣排列，已證明在體外可傳至40代。PUMC-HUVEC-T1內(nèi)皮標(biāo)記vWF、CD31、CD34均陽(yáng)性，可結(jié)合凝集素，電鏡下可見(jiàn)緊密連接和W-P小體，Matrigle上可形成管型。不同代數(shù)的HUVEC-T1細(xì)胞核型正常穩(wěn)定（P12、P13、P19、P38），裸鼠體內(nèi)接種不成瘤（P9和P33）。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 40μU/L胰島素 + 40U/ml 肝素 + 1% NEAA
傳代方法  1:3～1:4傳代，一周1～2次
傳代情況 P12
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：11，13；D16S539：9，12；D18S51：16，17；D21S11：28，30；D2S1338：17，19；D3S1358：15，17；D5S818：11，13；D6S1043：11，14；D7S820：8，11；D8S1179：13，14；FGA：24；Penta E：15，17；vWA：14，16；
同工酶 
染色體  46，XX
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。TdT 加尾法 DNA 生物素標(biāo)記試劑盒    5次
TE 緩沖液，PH7.0    10mL
TE 緩沖液，PH7.5    10mL
TE 緩沖液，PH8.0    10mL
TE 緩沖液，PH8.5    10mL
TEV 蛋白酶    300U
Tfl DNA 聚合酶    100U
TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10
TG1 菌種    1mL
TH1 菌種    1mL
Therminator DNA 聚合酶    200U
Therminator II DNA 聚合酶    100U
Therminator γ DNA 聚合酶    200UML-336 （10 mg）（E）-2-（（1,4-dimethylpiperazin-2-ylidene）amino）-5-nitro-N-phenylbenzamide
6-EAPB （hydrochloride） （1 mg）6-（2-Ethylaminopropyl）Benzofuran； 1-（benzofuran-6-yl）-N-ethylpropan-2-amine, monohydrochloride
cis-Tramadol （hydrochloride） CRM （2 mL）CG 315|Contramal|NIH 10969|Tramal|Ultram|Zydol；
SureLight R-Phycoerythrin （R-PE） （1 mg）SureLight R-Phycoerythrin （R-PE）
生物素標(biāo)記*基化組蛋白H3K4多肽Biotinylated Trimethyl Histone H3K4 Peptide （100 ul）
Z-VAD-FMK， Caspase-Family抑制劑（氟甲基酮）Caspase-Family Inhibitor Z-VAD-FMK
Z-VDVAD-FMK， Caspase-2抑制劑（氟甲基酮）Z-VDVAD-FMK
Aurora Kinase B抑制劑ADZ1152-HQPA
N-（3-Bromophenyl）-6，7-dimethoxy-4-quinazolinamine hydrochloride: AG 1517； NSC-669364； SU 5271PD 153035 Hydrochloride
23，27-Epoxy-3H-pyrido[2，1-c][1，4]oxaazacyclohentriacontine， AY 22989， SirolimusEZSolution Rapamycin
蛋白酶抑制劑套裝IV， EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail IV
NChloroquine Diphosphate
5-Chloro-N-[4-（cyclohexylureidosulfonyl）phenethyl]-2-methoxybenzamide； Glyburide， N-p-[2-（5-Chloro-2-methoxybenzamido）ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide
3-[（1R）-1-（2，6-dichloro-3-fluorophenyl）ethoxy]-5-（1-piperidin-4-ylpyrazol-4-yl）pyridin-2-amineCrizotinib
Polyethylene glycol sorbitan monolaurate， Polyoxyethylenesorbitan monolaurateTween 20， MegaPure Detergent， 10% Solution
4-[4-（1，3-benzodioxol-5-yl）-5-pyridin-2-yl-1H-imidazol-2-yl]benzamideSB-431542
2-（2-propylpyridin-4-yl）-4-（p-tolyl）thiazoleFatostatin
5-[4-（4-Chlorobenzoyl）-1-piperazinyl]-8-nitroquinoline， CPNQSIRT2 Inhibitor， B2
chloro[[2，EUK-134
LR4 激活劑    2mL
Tma 核酸內(nèi)切酶 III    500U
TMB 法地高雜交試劑盒    5次
TMB 法生物素雜交試劑盒    5次
TMRE    25mg
Tocopherol( 抗氧化劑 )    2g
*0 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10