人胚肺成纖維細(xì)胞；MRC-5價(jià)格售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

人胚肺成纖維細(xì)胞；MRC-5價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人胚肺成纖維細(xì)胞；MRC-5價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織。由 Jacobs JP于1966年建立。  
培養(yǎng)條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)   10%FBS
傳代方法  1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 PN15
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR  Amelogenin：XY；D8S1179：13；D21S11：31.2；D7S820：10,11；CSF1PO：11,12；D3S1358：15,17；TH01：8；D13S317：11, 14；D16S539：9, 11；D2S1338：20；D19S433：14,15；vWA：15；THOX：8；D18S51：15,21；D5S818：11, 12；FGA：21,23。
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

鳥嘌呤    5g
尿道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子    5mL
尿苷    5g
尿苷 -5'- 二磷酸    25mg
尿嘧啶    5g
尿嘧啶 -DNA 糖基化酶    500U
尿嘧啶切刻酶    50U
尿嘧啶糖基化酶抑制劑    200U
尿素    100g
尿酸    25g
尿酸酶    100U
脲酶 ( 尿素酶 巨豆 )    20Ku
鎳柱介質(zhì)    10mL
鎳柱介質(zhì)    2mL
檸檬酸 ( 無水 )    100g
檸檬酸鈉，二水    100gJWH 398 8-chloronaphthyl isomer （10 mg）（8-chloronaphthalen-1-yl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）methanone； JWH 398 8-chloronaphthyl isomer
JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer （1 mg）（7-ethyl-1-naphthalenyl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 234； JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer
2，3-Methylenedioxymethcathinone （hydrochloride） （10 mg）1-（benzo[d][1，3]dioxol-4-yl）-2-（methylamino）propan-1-one， monohydrochloride； 2，3-MDMC； 2，3-Methylenedioxymethcathinone （hydrochloride）
5，6-dehydro Arachidonic Acid （25 ug）8Z，11Z，14Z-eicosatrien-5-ynoic acid； 5，6-dehydro AA； 5，6-dehydro Arachidonic Acid
Eicosatetraynoic Acid （50 mg）5，8，11，14-eicosatetraynoic acid； ETYA； Eicosatetraynoic Acid
N-Oleoyl Glycine （10 mg）N-（9Z-octadecenoyl）-glycine； N-Oleoyl Glycine
5（S），6（R），15（R）-Lipoxin A4 （25 ug）5（S），6（R），15（R）-trihydroxy-7E，9E，11Z，13E-eicosatetraenoic acid； 5（S），6（R），15（R）-LXA4|AT-Lipoxin A4|15-epi Lipoxin A4； 5（S），6（R），15（R）-Lipoxin A4
Sumanirole Maleate （10 mg）5R，6-dihydro-5-（methylamino）-2Z-butenedioate-4H-imidazo[4，5，1-ij]quinolin-2（1H）-one； PNU 95666； Sumanirole Maleate
Etizolam （1 mg）4-（2-chlorophenyl）-2-ethyl-9-methyl-6H-thieno[3，2-f][1，2，4]triazolo[4，3-a][1，4]diazepine； AHR 3219|Depas|Y 7131； Etizolam
Entecavir （hydrate） （100 mg）2-ami，9-dihydro-9-[（1S，3R，4S）-4-hydroxy-3-（hydroxymethyl）-2-methylenecyclopentyl]-6H-purin-6-one， monohydrate； BMS 200475|Baraclude|SQ 34，676； Entecavir （hydrate）
ML-265 （25 mg）6-
凝固血液 DNAout    100 次
凝固血液 DNAout    30 次
凝膠法 miRNA 分離試劑盒     50 次
凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒    10x0.1mL
凝血酶    1000U