人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞；WI-38 VA13亞系2RA價(jià)格售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞；WI-38 VA13亞系2RA價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞；WI-38 VA13亞系2RA價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系衍生自WI-38細(xì)胞。WI-38細(xì)胞感染低滴度的SV40病毒，經(jīng)過連續(xù)傳代、克隆選擇獲得多株亞系，其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉(zhuǎn)移抗原，從而改變其有限細(xì)胞系的特性，可在常規(guī)條件下連續(xù)傳代。該細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)操作甚少在生物安全P2級(jí)條件下進(jìn)行。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C265
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

谷胱甘肽過氧化物酶檢測(cè)試劑盒    100 次
谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒    100 次 
谷胱甘肽瓊脂糖    2mL
谷胱甘肽一還原酶測(cè)試盒    50 T
骨骼肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子    5mL
鈷柱介質(zhì)    10mL
固藍(lán) BB 鹽    5g
固藍(lán) RR 鹽    5g
固綠    5g
固相 RNase 清除劑    100mL
固相 RNase 清除劑    250mL
固相內(nèi)毒素清除劑    100g
固相內(nèi)毒素清除劑    500g
硅基磁珠    2mL
硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )    1套
硅膠膜離心吸附柱 ( 大提 ) 收集管    1只
硅膠膜離心吸附柱 ( 小提 ) 收集管    50 只
硅膠膜離心吸附柱系列 ( 小提 )    50 套
硅膠膜離心吸附柱再生液    500 次
鮭魚精 DNA    100mg5-fluoro SDB-005 （1 mg）naphthalen-1-yl 1-（5-fluoropentyl）-1H-indazole-3-carboxylate
ML-60218 （5 mg）2-chloro-N-[3-（5-chloro-3-methylbenzo[b]thien-2-yl）-1-methyl-1H-pyrazol-5-yl]-benzenesulfonamide
Lamotrigine （10 mg）BW 430C|Epilepax|LTG|Lamictal； 6-
Zidovudine （100 mg）AZT|Azidothymidine|NSC 602670|Retrovir|ZDV； 3’-
Diclazepam （5 mg）2’-Chlorodiazepam|Ro 5-3448； 7-chloro-5-（2-chlorophenyl）-1,3-dihydro-1-methyl-2H-1,4-benzodiazepin-2-one
Conoidin A （50 mg）2,3-bis（bromomethyl）-quinoxaline 1,4-dioxide
2C-T-2 （hydrochloride） （exempt preparation） （1 mg）2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine； 4-（ethylthio）-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
Ivabradine （hydrochloride） （50 mg）S 16257； 3-[3-[[[（7S）-3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-yl]methyl]methylamino]propyl]-1,3,4,5-tetrahydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one, monohydrochloride
Edrophonium （chloride） （250 mg）Enlon|Tensilon； N-ethyl-3-hydroxy-N,N-dimethyl-benzenaminium, monochloride
MF498 （25 mg）N-[[[4-（5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl）-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide
Zalcitabine （500 mg）2’,3’-Dideoxycytidine|Hivid|NSC 606170|Ro 24-2027/000|ddC； 2’,3’-dideoxy-cytidine
Cefpodoxime （free acid） （100 mg）R 3763； （6R）-7R-[[（2Z）-2-（2-amino-4-thiazolyl）-2-（methoxyimino）acetyl]amino]-3-（methoxymethyl）-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine （5 mg）N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI； N-（4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene）-acetamide
鮭魚精 DNA 溶液    1mL
果膠    25g
果膠酶    100mg
果膠酶 Y-23    100mg
過硫酸銨    25g