詳細(xì)介紹
人羊膜細(xì)胞;WISH價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人羊膜細(xì)胞;WISH價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 zui初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的;角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C187
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
分枝桿菌 RNAout 50 次
分子生物學(xué)糖原干粉 1.0g
分子生物學(xué)糖原溶液,10mg/mL 1mL
分子雜交爐 1臺(tái)
吩硫酸甲酯 1g
酚 - 氯 - 異戊混合液 (DNA 提取 ) 100mL
酚 - 氯 - 異戊混合液 (RNA 提取 ) 100mL
酚 - 氯混合液 (DNA 提取 ) 100mL
酚 - 氯混合液 (RNA 提取 ) 100mL
糞便 DNAout 100 次
糞便 DNAout 30 次
弗氏不*佐劑 10mL
弗氏*佐劑 10mL
氟 25g
福林酚試劑 100mLCiticoline (sodium salt) (500 mg)P’-[2-(trimethylammonio)ethyl] ester-cytidine 5’-(trihydrogen diphosphate)-inner, monosodium salt; Cytidine 5’-diphosphocholine|Flussorex|Gerolin|Logan|Neurotron|Sinkron; Citicoline (sodium salt)
JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5 (1 mg)(1-(5-hydroxyhexyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)(naphthalen-1-yl)methanone; JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5
Cysmethynil (10 mg)5-(3-methylphenyl)-1-octyl-1H-indole-3-acetamide; Icmt Inhibitor; Cysmethynil
Clomifene (10 g)2-[4-(2-chloro-1,2-diphenylethenyl)phenoxy]-N,N-diethyl-ethanamine; Clomiphene B; Clomifene
Aprepitant (5 mg)5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]ethoxy]-3-(4-fluorophenyl)-4-morpholinyl]methyl]-1,2-dihydro-3H-1,2,4-triazol-3-one; Emend|L-754,030|MK 869|ONO-7436; Aprepitant
MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC (5 mg)N-(4-methoxy-1,4-dioxobutyl)-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-(4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)-L-valinamide; I 1270|MeOSuc-AAPV-AMC|Methoxy Succinyl-Ala-Ala-Pro-Val-AMC; MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC
FDU-PB-22 (10 mg)naphthalen-1-yl 1-(4-fluorobenzyl)-1H-indole-3-carboxylate; FDU-PB-22
β-Lapachone (50 mg)3,4-dihydro-2,2-dimethyl-2H-naphtho[1,2-b]pyran-5,6-dione; NSC 26326|SL 11001|ARQ 501|NSC 629749; β-Lapachone
ADB-PINACA pentanoic acid metabolite (10 mg)5-(3-((1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)carbamoyl)-1H-indazol-1-yl)pentanoic acid; ADB-PINACA pentanoic acid metabolite
腐胺 5g
G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物 25 OD
G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物 25 OD
GAL 指示劑培養(yǎng)基 100mL
GAPDH 小鼠單抗 1000μL
GAPDH 小鼠單抗 30μL