詳細介紹
人胚肺成纖維細胞;IMR-90圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞;IMR-90圖片
形態(tài)特性 成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 W.W. Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材,建立了人二倍體成纖維細胞株IMR-90。 [22381] 分裂潛能,病毒感受性和其它性質(zhì)都得到了充分研究,因而這株細胞可以作為WI-38或其它標準人肺細胞株的替代株。 有報道稱這株細胞在表現(xiàn)出衰老前可倍增58次。 [22381]
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(11+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
大提柱式 DNA 清除劑 5次
大提柱式 Ti 質(zhì)粒 DNAout 5次
大提柱式動物 DNAout 4次
大提柱式動物 RNAout 5次
大提柱式酵母 DNAout 4次
大提柱式土壤 DNAout 4次
大提柱式細菌 DNAout 4次
大提柱式細菌 DNAout( 含溶菌酶 ) 4次
大提柱式細菌 RNAout 5次
大提柱式血液 DNAout 4次
大提柱式血液 RNAout 5次
大提柱式藻類 RNAout 5次
大提柱式真菌 DNAout 4次
大提柱式真菌 RNAout 5次
大提柱式植物 DNAout 4次
大提柱式植物 RNAout 5次AZD 24614-[[4-fluoro-3-[(4-methoxy-1-piperidinyl)carbonyl]phenyl]methyl]-1(2H)-Phthalazinone
單甲基化組蛋白H3K9多肽Monomethyl Histone H3K9 Peptide (200 ul)
Z-YVAD-FMK, Caspase-1抑制劑(氟甲基酮)Caspase-1 Inhibitor Z-YVAD-FMK
Z-LEVD-FMK, Caspase-4抑制劑(氟甲基酮)Z-LEVD-FMK
PD184353CI-1040 (PD184352)
8-(2-Methylphenoxy)-2-(4-morphonilyl)-4(1H)-quinolinoneTGX-115
4-methyl-N-[3-(4-methyl-1H-imidazol-1-yl)- 5-(trifluoromethyl)phenyl]-3- [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino]benzamideNilotinib
Stem Cell Fate Regulator套裝IIIDiscoveryPak Stem Cell Fate Regulator Set III
2-Butyl-3-benzofuranyl-4-[2-(diethylamino)ethoxy]-3,5-diiodophenyl ketone hydrochlorideAmiodarone Hydrochloride
(4E)-Mycophenolic Acid
(6-((5-Fluoro-2-((3,4,5-trimethoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)amino)-2,2-dimethyl-3-oxo-2H-pyrido[3,2-b][1,4]oxazin-4(3H)-yl)methyl dihydrogen phosphate, disodiumFostamatinib Disodium
4-Nonylphenyl-polyethylene glycol, Imbentin-N/52, NP 40NP-40 Substitute, MegaPure Detergent, 10% Solution
α-Toluenesulfonyl fluoride, Benzylsulfonyl fluoride, Phenylmethylsulfonyl fluoridePMSF
Dodecyl maltosideDodecyl-β-D-maltopyranoside
CamboginolGarcinol
2’-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride, HOE 33342, Hoechst 33342, bisBenzimidebisBenzimide H 33342
[5-(1,1-Dioxo-thiomorpholin-4-ylmethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]-(tetrahydro-pyran-4-ylmethyl)-amine, dihydrochlorideNecrosis Inhibitor, Necrox-5
大提柱式質(zhì)粒 DNAout 10 次
大提柱式質(zhì)粒 DNAout 5次
帶柄尼龍篩 1個