詳細(xì)介紹
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞可用于血管內(nèi)皮修復(fù)損傷的研究。
培養(yǎng)條件 Medium 200 + LSGS
傳代方法
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
AP 標(biāo)記的抗地高抗體 10μL
AP 標(biāo)記的抗生物素抗體 10μL
ApaI 2000U
APMSF 溶液,10mg/mL 1mL
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白 10mg
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白 10mg
ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒 200 次
ATP 檢測試劑盒 200 次
ATP 硫酸化酶 10U
ATP 酶測試盒 ( 組織及細(xì)胞膜不需高速離心 ) 50 T
ATP 酶測試盒 ( 組織及細(xì)胞膜需高速離心 ) 50 T
ATP 溶液,100mM 0.25mL
ATP 溶液,1mM 1mL
ATP 溶液,2.5mM 2mL
ATP 依賴的 DNase 200U
吖啶橙 5g
阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑 100 次
阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑 500 次
阿拉伯樹膠粉 100g
阿利新藍(lán) 8GX 1g
埃文斯藍(lán) 1g
矮壯素 100g
氨芐青霉素干粉 1gJWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5 (500 ug)(1-(5-hydroxyhexyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)(naphthalen-1-yl)methanone; JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5
Cysmethynil (5 mg)5-(3-methylphenyl)-1-octyl-1H-indole-3-acetamide; Icmt Inhibitor; Cysmethynil
JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite (1 mg)[1-(5-hydroxyhexyl)-1H-indol-3-yl]-1-naphthalenyl-methanone; JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite
Vatalanib (hydrochloride) (100 mg)N-(4-chlorophenyl)-4-(4-pyridinylmethyl)-1-phthalazinamine, dihydrochloride; CGP 79787|PTK/ZK; Vatalanib (hydrochloride)
NSC 87877 (100 mg)8-hydroxy-7-[2-(6-sulfo-2-naphthalenyl)diazenyl]-5-quinolinesulfonic acid; NSC 87877
Polygodial (1 mg)(1R,4aS,8aS)-1,4,4a,5,6,7,8,8a-octahydro-5,5,8a-trimethyl-1,2-naphthalenedicarboxaldehyde; Tadeonal; Polygodial
PF-05274857 (hydrochloride) (10 mg)1-(4-(5’-chloro-3,5-dimethyl-[2,4’-bipyridin]-2’-yl)-piperazin)-3-(methylsulfonyl)-1-propanone, monohydrochloride; PF-05274857 (hydrochloride)
AB-PINACA-d9 (1 mg)(S)-N-(1-amino-3-methyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(pentyl-2,2’,3,3’,4,4’,5,5,5-d9)-1H-indazole-3-carboxamide; AB-PINACA-d9
1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC (500 mg)1,2-diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine; 1,2-DAPC|L-α-Diarachidonoyl lecithin|1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphocholine; 1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC
(R)-(-)-MT-45 (hydrochloride) (1 mg)1-cyclohexyl-4-[(1R)-1,2-diphenylethyl]-piperazine, dihydrochloride; (R)-(-)-MT-45 (hydrochloride)
ML-191 (5 mg)5-phenyl-3-(1-(1-(p-tolyl)cyclopropane-1-carbonyl)piperidin-4-yl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one; CCG-152883|CID-23612552; ML-191
Epalrestat (5 mg)5Z-[(2E)-2-methyl-3-phenyl-2-propen-1-ylidene]-4-oxo-2-thioxo-3-thiazolidineacetic acid; Kinedak|ONO-2235|Sorbistat; Epalrestat
Latanoprost (free acid)-d4 (1 mg)9α,11α,15R-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prost-5Z-en-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 17-phenyl-13,14-dihydro trinor Prostaglandin F2α-d4|PhXA 85-d4|Lat-FA-d4; Latanoprost (free acid)-d4