人乳腺上皮細(xì)胞；MCF-10A說明書采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

人乳腺上皮細(xì)胞；MCF-10A說明書現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱	人乳腺上皮細(xì)胞；MCF-10A說明書
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性   
培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  5%HS + 10ug/ml insulin + 20ng/ml EGF + 100ng/ml 霍亂毒素 + 0.5ug/ml 氫化可
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：10,12；D12S391：17,20；D13S317：8,9；S16S539：11,12；D18S51：18,19；D19S433：13,15；D21S11：28,30；D2S1338：21,26；D3S1358：14,18；D5S818：10,13；D6S1043：12,18；D7S820：10,11；D8S1179：14,16；FGA：22,24；Penta E：13,14；TH01：8,9.3；TPOX：9,11；vWA：15,17；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。4× 核酸液相雜交液    10mL
4mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)    1個(gè)
4mL DNA 離心超濾管 (300-500 KD)    1個(gè)
4mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)    1個(gè)
4mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)    1個(gè)
4mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)    1個(gè)
5'- 單磷酸腺苷二鈉    5g
5- 氟 -5’- 脫氧尿苷    10mg
5- 磷酸吡哆醛，一水    1g
5- 溴 -2'- 脫氧尿苷    100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷    100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷    100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基磷酸鹽 (BCIP)    100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)    100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷    5mg
5(6)-CFDA    100mg
5(6)-TRITC    10mg
5,5- 二硫代雙 (2- 硝基苯甲酸 )    1g
5′ - 二磷酸鳥苷二鈉    10mg
5′ - 三磷酸鳥苷三鈉    10mg
5-Carboxyfluorescein    100mg
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester    10mg
5-FITC    1g
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )    1mL
5'-RACE 試劑盒    10 次Ovalbumin Precoated 96-Well Strip Plate （1 ea）Ovalbumin Precoated 96-Well Strip Plate
17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum （500 dtn）Bimatoprost EIA Antiserum； 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum
15（S）-HpEDE （250 ug）15S-hydroperoxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（S）-HpEDE
sPLA2 （human Type IIA） Affinity Sorbent （1 mL）Secretory Phospholipase A2 （human synovial）； sPLA2 （human Type IIA） Affinity Sorbent
Tris-HCl Stock Solution （1 M， pH 7。0） （1 L）Tris-HCl Stock Solution （1 M， pH 7。0）
TBS Stock Solution （10X， pH 7。4） （250 mL）Tris-buffered Saline； TBS Stock Solution （10X， pH 7。4）
Docosahexaenoyl PAF C-16 （1 mg）1-O-hexadecyl-2-O-（4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z-docosahexaenoyl）-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； Docosahexaenoyl PAF C-16
2-Arachidonyl Glycerol ether （5 mg）5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraen-2-glyceryl ether； 2-AG ether|Noladin； 2-Arachidonyl Glycerol ether
Oleyl Trifluoromethyl Ketone （50 mg）1，1，1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one； OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone； Oleyl Trifluoromethyl Ketone
DMSO Assay Reagent （3 ml）DMSO Assay Reagent
SIRT2 Direct Peptide （1 ea）SIRT2 Direct Peptide
Coenzyme A Standard （5 mg）Coenzyme A Standard
PK/PEP Cofactor Mixture （1 mg）PK/PEP Cofactor Mixture
GPx Co-Substrate Mixture （40 wells）GPx Co-Substrate Mixture
SOD Assay Sample Buffer （10X） （1 ea）Sample Buffer （10X）； SOD Assay Sample Buffer （10X）
LY255283 （5 mg）1-[5-ethyl-2-hydroxy-4-[[6-methyl-6-（1H-tetrazol-5-yl）heptyl]oxy]phenyl]-ethanone； LY255283
PHOP （5 mg）1-oxazolo[4，5-b]pyridin-2-yl-6-phenyl-1-hexanone； CAY10402|Phenyl hexanoyl oxazolopyridine； PHOP
Potassium Hydroxide Assay Reagent （1 ea）Potassium Hydroxide； Potassium Hydroxide Assay Reagent
Nω-propyl-L-Arginine （100 mg）N5-[imino（propylamino）methyl]-L-ornithine； Nω-propyl-L-Arginine
Staurosporine （1 mg）2，3，10，11，12，13-hexahydro-10R-methoxy-9S-methyl-11R-methylamino-9S，13R-epoxy-1H，9H-diindolo[1，2，3-gh； 3’，2’，1’-lm]pyrrolo[3，4-j][1，7]benzodiazonin-1-one； Stsp； Staurosporine
Dihydrorhodamine 123 （5 mg）2-（3，6-diamino-9H-xanthen-9-yl）-benzoic acid， methyl ester； DHR； Dihydrorhodamine 123