詳細(xì)介紹
人胚胎肌肉組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HSM-2圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人胚胎肌肉組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HSM-2圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 梭形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織,中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:9,11;D16S539:11,13;D18S51:12,13;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:17,23;D3S1358:16;D5S818:9,11;D7S820:10,12;D8S1179:10,13;FGA:21,25;TH01:7,9;TPOX:8,11;vWA:14,16; 同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
MB Substrate Solution (12 ml)TMB Substrate Solution
Anti-Human IgG4 Precoated 96-Well Strip Plate (1 ea)Anti-Human IgG4 Precoated 96-Well Strip Plate
Thromboxane B2 EIA Antiserum (500 dtn)Thromboxane B2 EIA Antiserum
JWH Metabolite ELISA Negative Control (1 ea)JWH Metabolite ELISA Negative Control
13(S)-HpODE (50 ug)13S-hydroperoxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(S)-HpODE
Tris-HCl Stock Solution (1 M, pH 8。0) (1 L)Tris-HCl Stock Solution (1 M, pH 8。0)
Cell-Based Annexin V FITC (50 uL)Cell-Based Annexin V FITC
Arachidonoyl PAF C-16 (5 mg)1-O-hexadecyl-2-O-(5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 1-O-hexadecyl-2-Arachidonoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine; Arachidonoyl PAF C-16
Palmitoyl Serinol (100 mg)N-[2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)ethyl]-hexadec*; Palmitoyl Serinol
1-Palmitoyl-2-oleoyl-3-linoleoyl-rac-glycerol (100 mg)3-[(1-oxohexadecyl)oxy]-2-[[(9Z)-1-oxo-9-octadecenyl]oxy]-9Z,12Z-octadecadienoic acid propyl ester; POL; 1-Palmitoyl-2-oleoyl-3-linoleoyl-rac-glycerol
Fluorometric Thiol Detector (300 ul)Fluorometric Thiol Detector
SIRT6 (human recombinant) Direct Assay Reagent (1 ea)SIRT6 (human recombinant); SIRT6 (human recombinant) Direct Assay Reagent大腸菌群顯色培養(yǎng)基/Coliform Chromogenic Medium快速準(zhǔn)確檢測(cè)大腸菌群,大腸菌群培養(yǎng)24小時(shí),顯蘭色1升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
貓腎上細(xì)胞英文名稱:CRFK
酪蛋白瓊脂/水解酪蛋白瓊脂/Casein Agar Medium用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎管狀上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
糖蛋白胨培養(yǎng)液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RN-c, 大鼠質(zhì)神經(jīng)元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
中國(guó)藍(lán)薔薇酸瓊脂250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Ca Ski(人宮頸上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
RWPE1(人前列腺上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞英文名稱:DCS
Pyruvate Assay Buffer (10X) (10 ml)Pyruvate Assay Buffer (10X)
Malate Fluorometric Cofactor (1。5 mg)Malate Fluorometric Cofactor
GR Glutathione Reductase (control) (1 ea)GR Glutathione Reductase (control)
Hydrogen Peroxide Assay (urinary) Reagent 2 (1 ea)Reagent 2; Hydrogen Peroxide Assay (urinary) Reagent 2