詳細介紹
人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2價格【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2價格
形態(tài)特性
生長特性 貼壁生長
特征特性 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織,該細胞由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
3-(Ethyldimethylammonio)propane-1-sulfonateNDSB-195
1-[4-amino-2-(ethoxymethyl)imidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-2-methylpropan-2-ol; R-848Resiquimod
[[4-Chloro-6-[(2,3-dimethylphenyl)- amino]-2-pyrimidinyl]thio]acetic acid; Pirinixic acidWY-14643
3-NP3-Nitropropionic acid
5-(2-Thienylcarbonyl)-1H-benzimidazol-2-yl]carbonic acid, methyl esterNocodazole
Vemurafenib; RG7204, RO5185426PLX-4032
3-SB 939
2-Iminothiolane HCl; 2-IT; Dihydro-2-(3H)-thiophenimine hydrochloride; Dihydro-2-(3H)-thiophenimine HClTraut’s Reagent
S-2(3-Aminopropylamino)-ethylphosphothioic acid; WR2721Amifostine
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-yl)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-butyl)-1H-benzo[d]imidazol-2-yl)ethyl)cyclobutyl)(isopropyl)amino)methyl)tetrahydrofuran-3,4-diolEZSolution EPZ-5676
1-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-4-N-pyridin-4-ylbenzene-1,4-diamine; SerdemetanJNJ-26854165MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
MDCK(犬腎細胞)5×106cells/瓶×2gersion
ME-180(人子宮頸表細胞)5×106cells/瓶×2
HK-2, 人腎質(zhì)近曲小管上細胞
Acc-2(人涎腺腺樣囊性細胞)5×106cells/瓶×2
CSC, 小鼠心肌細胞
小鼠膀胱上細胞*培養(yǎng)基100mL
A673(人橫紋肌瘤細胞)5×106cells/瓶×2
蘇木素染色液規(guī)格:100ml
4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基(配套靛基質(zhì))/MUG培養(yǎng)基/MUG-Medium(with Kovacs)大腸埃希氏菌快速熒光測定培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m國產(chǎn)/進口
人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤英文名稱:H4
PALCAM瓊脂/PALCAM Agar單增李氏菌的選擇性分離250克國產(chǎn)/進口
人急性混合型白血病細胞英文名稱:HAL-01
改良MC培養(yǎng)基/改良MC酸菌瓊脂培養(yǎng)基/改良CHALMERS培養(yǎng)基/Chalmers Agar Modified用于食品中酸菌總數(shù)的測定250克國產(chǎn)/進口
廣譜彩虹預(yù)染蛋白Marker100次國產(chǎn)
SW480(人結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2
SS瓊脂平板/SS Agar Plate沙門菌屬和志賀菌屬細菌的分離培養(yǎng)10塊國產(chǎn)/進口
RBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞)5×106cells/瓶×2gersion
高氏合成一號瓊脂培養(yǎng)基/GAUZEˊs Medium 放線菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
非洲綠猴腎細胞英文名稱:VERO
明膠瓊脂培養(yǎng)基/Gelatin Agar Medium250克國產(chǎn)/進口
大鼠肝細胞瘤細胞英文名稱:H-4-II-E
4’,7-Dihydroxy-5-methoxy-8-prenylflavanone; Humulol; IXNIsoxanthohumol
Sodium Pneumocandin A0, 1-((4R,5R)-4,5-dihydroxy-N2-(4-(5-(4-(pentyloxy)phenyl)-3-isoxazolyl)benzoyl]-L-ornithine)-4-((4S)-4-hydroxy-4-(4-hydroxy-3-(sulfooxy)phenyl)-L-threonine)-Micafungin sodium