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ATCC細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常原因
閱讀:3010 發(fā)布時間:2018-7-5血清是一種成分復(fù)雜的混合物,且對ATCC細(xì)胞生長具有促進(jìn)作用,我們培養(yǎng)細(xì)胞離不開血清。那在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響都有哪些表現(xiàn)?
1、細(xì)胞生長速度緩慢,長滿單層時間長;從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞,用同一種培養(yǎng)液,分別加入10%的對照血清和待檢血清,在相同條件下培養(yǎng)72小時,會出現(xiàn)對照血清長滿單層,而待檢血清大約只有60~70%,這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞。
2、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常,細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化 ;由于血清的質(zhì)量問題,使原本狀態(tài)正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差;
比如:細(xì)胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動的小黑點(diǎn)(并非污染),或者細(xì)胞表面形成一層油狀覆蓋物;細(xì)胞的輪廓變得模糊,細(xì)胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充,從而影響細(xì)胞向四周擴(kuò)展生長。
3、細(xì)胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,不能連續(xù)傳代 ;質(zhì)量較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子,會使細(xì)胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力。細(xì)胞會從正常的貼壁狀態(tài),邊緣開始萎縮,上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細(xì)胞表面不光滑,晃動細(xì)胞瓶會看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動。隨著傳代次數(shù)增加,細(xì)胞萎縮的情況越來越嚴(yán)重,直到終*脫壁而死亡。
4、細(xì)胞長的很好,致密的單層,狀態(tài)也很正常,但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變,做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度。這種情況也許是因?yàn)?血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。
5、ATCC細(xì)胞生長的狀態(tài)一般,產(chǎn)毒少,毒價低。這種情況比較常見,細(xì)胞是病毒的載體,由于血清質(zhì)量不好,導(dǎo)致細(xì)胞生長狀態(tài)不好,病毒就無法進(jìn)行正常的復(fù)制。并非所有病毒都不能復(fù)制,所以就造成疫苗的效價不夠,可能造成不合格產(chǎn)品。
Eugenol 丁香酚 97-53-0 HPLC≥98% 0.5ml/支
Cyclovirobuxine 黃楊堿 環(huán)維黃楊星D;環(huán)常綠黃楊堿D 860-79-7 滴定法≥99% 20mg/支
Salidroside 紅景天苷 紅景天甙 10338-51-9 HPLC≥98% 20mg/支
Rosarin 絡(luò)塞琳 84954-93-8 HPLC≥98% 20mg/支
Rosavin 絡(luò)塞維 84954-92-7 HPLC≥98% 20mg/支
Rosin 絡(luò)緦 85026-55-7 HPLC≥98% 20mg/支
Rosiridin 絡(luò)塞定 100462-37-1 HPLC≥98% 20mg/支
Sophocarpine 槐果堿 145572-44-7 HPLC≥98% 20mg/支
Taxifolin 花旗松素 二氫槲皮素;紫杉葉素;黃杉素 480-18-2 HPLC≥98% 20mg/支
ATCC細(xì)胞