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為什么腫瘤細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染?
閱讀:1249 發(fā)布時間:2017-12-14腫瘤細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細(xì)胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。
目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機會比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。
其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。
為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如engreen的Entranster試劑,納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的,電擊對細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到zui低,如Entranster-E。
腫瘤細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
含量測定 100mg 100792-200601 馬來酸氟伐沙明
HPLC法含量測定 100mg 100793-200501 苯甲酸利扎曲普坦
含量測定 100mg 100795-200401 二乙酰氨乙酸乙二胺
含量測定 100mg 100800-200701 氟伐他汀鈉
檢查用 100mg 100803-201002 丙硫氧嘧啶
UV法鑒別 300mg 100806-200801 丙泊酚
UV法含量測定 100mg 100807-200501 鹽酸賽利洛爾
含量測定 100mg 100808-200902 阿卡波糖
腫瘤細(xì)胞