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【2015版中國藥典-中藥篇】野菊花分析
閱讀:3292 發(fā)布時間:2018-7-27【2015版中國藥典-中藥篇】野菊花分析
■《中國藥典》 收載情況
【來源】 本品為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。秋、冬兩季花初開放時采摘,曬干,或蒸后曬干。
【功能與主治】 清熱解毒,瀉火平肝。用于疔瘡癰腫,目赤腫痛,頭痛眩暈。
【含量測定】 蒙花苷照液相色譜法(通則0512)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-冰醋酸(26:23:1)為流動相;檢測波長為334 nm。理論板數(shù)按蒙花苷峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備:取蒙花苷對照品適量,精密稱定,加甲醇(必要時加熱)制成每1 mL含25μg的溶液,即得。
供試品溶液的制備:取本品粉末(過三號篩)約0.25 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇100 mL,稱定重量,加熱回流3小時,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 µL,注入液相色譜儀,測定,即得。
■野菊花藥材液相色譜方法的建立
【色譜行為描述】
《中國藥典》中野菊花的含量測定以蒙花苷為質(zhì)量評價依據(jù),蒙花苷在InertsilODS-3(4.6×250mm,5μm)中的色譜行為是:在流動相組成為甲醇-水-冰醋酸系統(tǒng)時,流動相的比例對蒙花苷及其相鄰色譜峰的分離度有一定影響,流動相比例為甲醇:水:醋酸=52:46:2時,其分離效果與分析時間合適,選擇甲醇的比例在48%~57%(v/v)之間均可獲得較好的分析效果;柱溫對蒙花苷的保留時間及其相鄰色譜峰的分離度有微小影響,經(jīng)考察建議溫度為30℃;流動相中醋酸對蒙花苷的分離度及拖尾因子均無明顯影響,但對分析時間有一定的改變,在醋酸濃度2%(pH=2.01)時較為合適。推薦流動相配比范圍:甲醇:水:冰醋酸(48~57):(41~51):(1~5),柱溫范圍:25~35℃。綜上所述,經(jīng)考察在流動相甲醇-水-冰醋酸比例為52:48:2,柱溫30℃的色譜條件下能得到較滿意的分析效果。
野菊花在上述色譜條件下,采用Shim-pack VP-ODS色譜柱表現(xiàn)出和Inertsil ODS-3色譜柱相似的色譜行為,保留時間和柱效相當(dāng)。
樣品來源: 本品為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。秋、冬兩季花初開放時采摘,曬干,或蒸后曬干。
對照品: 蒙花苷(成都曼斯特生物科技有限公司,批號:MUST-15101207,含量:99.51%)
對照品溶液的制備: 取蒙花苷對照品適量,精密稱定,加甲醇(必要時加熱)制成每1 mL含25μg的溶液,即得。
供試品溶液的制備: 取本品粉末(過三號篩)約0.25 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇100 mL,稱定重量,加熱回流3小時,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
推薦使用色譜條件: | 儀器配置: | ||
色譜柱: | InertsilODS-3 (4.6×250 mm,5 μm ) | LC-20AD 高壓泵 | |
流動相: | 甲醇-水-冰醋酸(26:23:1) | SPD-10AVP紫外可見光檢測器 | |
柱溫: | 30℃ | DGU-20A3脫氣機 | |
檢測波長: | 334nm | CTO-10ASVP柱溫箱 | |
流速: | 1.0mL/min | SIL-10ADVP 自動進樣器 | |
進樣量: | 20μL | ||
*此條件同樣適用于Shim-pack VP-ODS(4.6×250 mm, 5 μm),相關(guān)譜圖見附注1。 |
■蒙花苷對照品溶液:
■供試品溶液:
■蒙花苷標(biāo)準(zhǔn)曲線:
■蒙花苷的重復(fù)性:
序號 | 對照品(10μL) | 樣品(20μL) | ||
---|---|---|---|---|
t/min | 峰面積 | t/min | 峰面積 | |
1 | 13.041 | 1320558 | 12.924 | 1442579 |
2 | 13.083 | 1316741 | 12.950 | 1431804 |
3 | 13.020 | 1317305 | 13.013 | 1427972 |
平均值 | 13.048 | 1318201 | 12.960 | 1434118 |
RSD/% | 0.24 | 0.16 | 0.35 | 0.53 |
附注1:Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm,5μm )色譜柱用于野菊花分析
■蒙花苷對照品溶液:
■供試品溶液:
* 實驗數(shù)據(jù)由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部陳世忠教授課題組提供