人小反芻獸疫抗體(PPR)ELISA Kit
1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置1-2 h或4℃隔夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素na或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血guan或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3. 細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
人小反芻獸疫抗體(PPR)ELISA Kit
(2)細(xì)胞裂解液
收集細(xì)胞培養(yǎng)液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH 7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,除去細(xì)胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
玻璃珠法:預(yù)先將適量的玻璃珠(根據(jù)采血量多少而定)清洗后,裝入采血容器中,滅菌后備用。采血過程中,邊采邊搖采血瓶,以使小玻璃珠在血液中滾動(dòng),以機(jī)械地除去纖維蛋白,使血液不能凝固。本法雖較麻煩,但對(duì)淋巴細(xì)胞的活性影響zui小,且可減少血小板的混雜。
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