人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA Kit

1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，全血標(biāo)本室溫放置1－2 h或4℃隔夜，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法：

根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素na或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的采血guan或離心管采集血液標(biāo)本，室溫混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

3. 細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:

（1）細(xì)胞培養(yǎng)上清

取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

（2）細(xì)胞裂解液

收集細(xì)胞培養(yǎng)液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，棄去上清，用預(yù)冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，除去細(xì)胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

玻璃珠法：預(yù)先將適量的玻璃珠（根據(jù)采血量多少而定）清洗后，裝入采血容器中，滅菌后備用。采血過(guò)程中，邊采邊搖采血瓶，以使小玻璃珠在血液中滾動(dòng)，以機(jī)械地除去纖維蛋白，使血液不能凝固。本法雖較麻煩，但對(duì)淋巴細(xì)胞的活性影響zui小，且可減少血小板的混雜。

溫馨提示：本產(chǎn)品僅供研究，不用于診斷或治療；

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