HAKATA胎牛血清
產(chǎn)品貨號(hào):HN-FBS-500
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):
1、內(nèi)毒素含量低,三次納米級(jí)過濾
2、嚴(yán)格控制批次差異
3、來源可靠、可溯源
4、每個(gè)批次均提供檢驗(yàn)檢疫報(bào)告
5、適合各種常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)
6、干冰運(yùn)輸,建議存儲(chǔ)溫度為-10℃至-20℃
HAKATA胎牛血清的主要成分
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,胎牛血清是品質(zhì)很高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分很少。
胎牛血清的功能
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
血清主要作用
提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長 必須的物質(zhì)。
提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素、類固 醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血 小板生長因子等。
提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪 、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。
提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋 白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的 的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳 代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí) ,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x解毒中起重要作用, 如SeO3,硒等 .
血清保存
血清應(yīng)保存在-5。C至-2O。C。若存放于4。C 時(shí),保質(zhì)期減至一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi) ,再放回冷凍。
解凍血清
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8。C冰箱使之溶解,然后在室溫下使 之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
注意事項(xiàng):
1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。
C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.
3、請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56。C,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖 晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。 [5]血清解凍后發(fā) 現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離 心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方 法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。
何謂熱滅活?
一般是以56C,30分鐘來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化, 而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增 強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理 過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛?響了血清的質(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯 著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血 清遭受污染,而把血清放在37C環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省您 寶貴的時(shí)間,更確保您血清的質(zhì)量!另外,購買已滅活成品也不失一個(gè)捷徑,請(qǐng)?jiān)谫徺I的 時(shí)候注意詢問廠家是否是已滅活血清。