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        1. 上海仁捷生物科技有限公司

          上海仁捷生物-豬 KL-6 ELISA試劑盒檢測方法

          時(shí)間:2017-7-5閱讀:1417

          豬Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6)試劑盒(ELISA)

          操作步驟

          1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
          2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
          3.   樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。
          4.   除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
          5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
          6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
          7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

           

          實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

          所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品濃度。

           

          試劑盒性能

          •  檢測范圍25 IU/mL  800 IU/mL
          •  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 IU/mL。
          •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
          •  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

          試劑盒組成

           

          名稱

          96孔配置

          48孔配置

          備注

          微孔酶標(biāo)板

          8孔×12

          8孔×6

          標(biāo)準(zhǔn)品

          0.3mL*6管

          0.3mL*6管

          樣本稀釋液

          6mL

          3mL

          檢測抗體-HRP

          10mL

          5mL

          20×洗滌緩沖液

          25mL

          15mL

          按說明書進(jìn)行稀釋

          底物A

          6mL

          3mL

          底物B

          6mL

          3mL

          終止液

          6mL

          3mL

          封板膜

          2張

          2張

          說明書

          1份

          1份

          自封袋

          1個(gè)

          1個(gè)

          1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:800、400、200、100、50、25 IU/mL

          2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

           

          本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本豬Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原KL-6)的含量。

          有效期:6個(gè)月

          保存條件:2-8℃

           

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