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測定意義:S-NR 催化土壤中硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,是土壤硝態(tài)氮還原的關(guān)鍵酶。研究S-NR 的活性對合理施肥,降低氮素的損失具有重要意義。
測定原理:S-NR 催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,與對–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物;生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有大吸收峰,可用分光光度法測定。
自備實驗用品及儀器:可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項:
1、 試劑一、試劑二和試劑四在冰上放置,用完立即放回-20℃。
2、 每個測定管設(shè)一個對照管。
3、 ΔA測定過小(小于0.01),可延長反應(yīng)時間(37℃水浴時間)。
4、 當ΔA大于1時,可以將上清液用蒸餾水稀釋后,再進行測定,計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
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