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圓二色光譜儀在測試時有哪些注意事項
閱讀:2092發(fā)布時間:2022-8-5
圓二色光譜(簡稱CD)是應用廣泛的測定蛋白質二級結構的方法,是研究稀溶液中蛋白質構象的一種快速、簡單、較準確的方法。它可以在溶液狀態(tài)下測定,較接近其生理狀態(tài)。而且測定方法快速簡便,對構象變化靈敏,所以它是目前研究蛋白質二級結構的主要手段之一,并已廣泛應用于蛋白質的構象研究中。
圓二色光譜儀的測試注意事項
(1) 在標準操作時,譜帶寬度選為1 nm。對于高分辨率測量,要用較窄的狹縫寬度,此時光電倍增管的電壓較高,譜的信噪比差。雖然對于正常測量最佳譜帶寬度是1~2 nm,但是在下列情況下要犧牲分辨率而需要較寬的狹縫寬度。當樣品的吸光度很高但CD信號很弱時,一方面要盡量保證測定CD峰所需要的足夠濃度,另一方面要設置較寬的狹縫。不過此時要特別小心,因為樣品在吸光度過高(A>2)的情況下可能存在熒光或雜散光引起的某些假象。另外,在固體CD光譜測試時也需要較大的狹縫寬度(一般要求 > 2 nm)。
(2)橢圓率和摩爾橢圓率都依賴于測量條件。因此,溫度、波長和樣品濃度總是應該特別注明的。
(3) 當用壓片法或石蠟油研磨法進行固體粉末樣品測試時,要盡可能地研磨獲得細小均勻的樣品顆粒。采用石蠟油糊方法時,必須注意某些憎水有機化合物可能溶于石蠟油中,這時所得CD光譜在某種意義上應視為溶液CD光譜。采用壓片法測試固體CD時,在保證手性樣品的定性濃度達到CD光譜儀檢測要求的同時,片越薄越透明越好(但切忌破損)。在某些情況下,壓片法不適用于手性抗衡陰離子存在下的固體誘導CD光譜的測定。
圓二色光譜儀使用時發(fā)生故障怎么做
1、儀器發(fā)生故障時應及時報告技術人員處理.儀器發(fā)生異?,F象時,馬上關閉電源,保護現場并及時上報。
2、不亂按鍵盤,操作人員不得進入操作規(guī)程規(guī)定以外的任何程序,不得按規(guī)定以外的任何功能鍵.卸下火花臺板時要輕拿輕放,防止內表面劃傷.取出火花室內圓石英墊片和玻璃套管時務必謹慎小心,防止操作不當致其破碎。
3、壓樣品夾子要垂直,不得在未夾好樣品時按激發(fā)鍵,不得在激發(fā)時觸摸或抬起樣品夾.如果遇到激發(fā)時聲音很大,應該按F3鍵停止,不允許直接抬起樣品夾,否則易造成電路板燒毀。
4、激發(fā)樣品后在火花臺內產生黑色沉積物可導致電極與火花臺之間短路,所以火花臺應定期清理。
5、非崗位人員不得隨便進入機房,機房內禁止吸煙,吃食物。
6、如果遇到突然斷電時,應先關總,再將其它電源關閉,等到來電后,按規(guī)程條款進行開機操作。
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