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針對(duì)茶葉復(fù)雜基質(zhì),參考【GB 5009.22-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測(cè)定】,建議實(shí)驗(yàn)過程如下:
1檢測(cè)方法
1.1 第一法(液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法)
黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:AFB1:AFB2:AFG1:AFG2為1:0.3:1:0.3ug/mL
黃曲霉毒素混合同位素內(nèi)標(biāo)工作液:AFB1:AFB2:AFG1:AFG2為0.5 ug/mL
稱取 5g試樣(根據(jù)樣品吸水性可調(diào)整)+50uL混合標(biāo)準(zhǔn)工作液+40uL混合同位素內(nèi)標(biāo)工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min(離心速度 4000r/min)→取上清液4mL過PriboFast®MFC160/260固相凈化柱→取2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗,再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液,使空氣進(jìn)入柱子,將水?dāng)D出柱子→用2mL甲醇洗脫,收集洗脫液于試管中→50℃下氮?dú)獯抵两?,?/span>0.5mL流動(dòng)相復(fù)容→微孔濾膜(0.22μm)濾過,取續(xù)濾液上機(jī)。
1.2 第二法(液相色譜法)
黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:AFB1:AFB2:AFG1:AFG2為1:0.3:1:0.3 ug/mL
稱取 5g試樣+50uL混合標(biāo)準(zhǔn)工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min(離心速度 4000r/min)→取上清液4mL過PriboFast®MFC160/260固相凈化柱→取2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗,再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液,使空氣進(jìn)入柱子,將水?dāng)D出柱子→用2mL甲醇洗脫,收集洗脫液于試管中→50℃下氮?dú)獯抵两桑?/span>0.5mL流動(dòng)相復(fù)容→微孔濾膜(0.22μm)濾過,取續(xù)濾液上機(jī)。
樣品來源:檢測(cè)樣品庫中,選取紅茶、綠茶各一種有代表性的茶葉,分別做兩種方法的本底和加標(biāo)平行。
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