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色譜柱孔徑選擇小知識(shí)
閱讀：5447發(fā)布時(shí)間：2015-12-22
1.測(cè)量法和表示
孔徑分布和比表面積可以通過(guò)相同的方法來(lái)測(cè)量，如：氮吸附法和汞空隙率測(cè)定計(jì)平均孔徑也能通過(guò)逆向分子排阻法來(lái)測(cè)量，但真正的孔徑分布不能用個(gè)方法來(lái)測(cè)量。不過(guò)，因其它方法存在一些問(wèn)題，高聚物填料仍然要采用逆向分子排阻法?？讖接胣m或埃做單位?？讖椒植嫉闹凳菢?biāo)稱(chēng)的，而且不同生產(chǎn)商有不同的方法。所以，某生產(chǎn)商標(biāo)稱(chēng)10nm的可能與另一生產(chǎn)商標(biāo)稱(chēng)8nm或12nm的相同。
2.孔徑與保留
孔徑是填料物理性質(zhì)的一個(gè)基本因子，并決定顆粒相比率（phase ratio）。進(jìn)一步?jīng)Q定了填料的保留性質(zhì)和載樣量。
3.孔徑和分子量
被分析物分子小隨分子量增加而增大。如果其分子量大小約為孔徑的三分之一或大，則傳質(zhì)會(huì)嚴(yán)重受阻并造成低效能和峰展寬。這樣的情況下，要用更大孔徑的填料。對(duì)所有標(biāo)準(zhǔn)分析問(wèn)題，通常用孔徑在大概6nm到13nm之間的填料。更大孔徑的填料也可以用在肽類(lèi)分離上。分子量比肽更大的，如蛋白質(zhì)，用30nm孔徑的填料更加合適。但這樣的填料與小分子作用的不好，因?yàn)楸缺砻娣e減少了。對(duì)被分析物分子量小于3000的，應(yīng)用孔徑小些的。被分析物分子量大于10000的，應(yīng)用孔徑30nm的填料。分子量介于3000到10000的，大的小的都可以得到滿(mǎn)意結(jié)果。
4.孔徑分布
大HPLC填料的孔徑分布跨度有一個(gè)數(shù)量級(jí)。這樣的分布對(duì)大多數(shù)實(shí)用目的已經(jīng)足夠的窄了。然而，微孔的減少時(shí)填料的性能提高了。這可能是有窄孔徑分布的填料如Waters Spherisorb的一個(gè)優(yōu)勢(shì)。
5.非孔填料
非孔填料能用于高分子量的、在大孔徑填料中表現(xiàn)出擴(kuò)散受限制的被分析物。但是，只能得到有限的比表面積。
6.選擇正確的孔徑
被分析物的分子量 推薦使用的填料孔徑
<3000 6到13nm
3000到10000 10nm
>10000（例如蛋白質(zhì)） 30到100nm
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