細胞名稱  人淋巴細胞；1301培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法

傳代情況 Unknown

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 B類

人淋巴細胞；1301培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
PCNA 大鼠增殖細胞核抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-EGFR 表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Myf6 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 規(guī)格 0.2ml

C3bR(Human Complement fragment 3b rccptor) ELISA Kit 人補體片段3b受體 96T

Alpha SNAP 英文名稱： 可溶性附著蛋白α-SNAP抗體 0.2ml

CCN1 英文名稱： 富半胱酸肝素結(jié)合蛋白61抗體 0.1ml

Anti-EGFR 表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
VLDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit 人極低密度脂蛋白受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-LAMR1 層粘連蛋白受體1抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh ITGB4 整合素β4抗體 規(guī)格 0.1ml

EPO ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素 96T

Piccolo 英文名稱： 神經(jīng)細胞突觸蛋白PCLO抗體 0.2ml

C20orf4 英文名稱： 20號染色體開放閱讀框4抗體 0.2ml

Anti-LAMR1 層粘連蛋白受體1抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人硒蛋白P1(SEPP1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠碳酸酐酶Ⅱ(CA2)ELISA試劑盒，英文名：CA2 ELISA KiISA Kit for Hyaluronic acid小鼠胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA試劑盒，英文名：CASP14 ELISA Kit人高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)ELISA試劑盒人96T12.5-800 ng/mL小鼠對氧磷酶1(PON1)ELISA試劑盒，英文名：PON1 ELISA KiISA Kit for Human Acetolactate synthase-like protein小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑3(CST3)ELISA試劑盒，英文名：CST3 ELISA Kit人胰島素受體(ISR)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠Slit同源物3(Slit3)ELISA試劑盒，英文名：Slit3 ELISA KiISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 1小鼠Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒，英文名：COL4 ELISA Kit人亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(Cystinyl aminopeptidase)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒，英文名：LPS ELISA Kit

人質(zhì)子肌醇轉(zhuǎn)運蛋白ELISA試劑盒人96T0.47-30 ng/mL大鼠膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒，英文名：ANXA5 ELISA KiISA Kit for Human Lysozyme C大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒，英文名：TSP-1 ELISA Kit人細胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase subunit 3)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒，英文名：MTL ELISA KiISA Kit for Human Microtubule-associated protein 2大鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒，英文名：NF ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7/MAT)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒，英文名：ET ELISA KiISA Kit for Human NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 7, mitochondrial大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒，英文名：ATGA/TGAB ELISA Kit人氧化低密度脂蛋白受體1(Ox-LDL receptor 1)ELISA試劑盒人96T9.375-600 pg/mL大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)ELISA試劑盒，英文名：COX-1 ELISA Kit
小鼠IgG干粉 10mg/50mg/100mg 國產(chǎn)

WDR19 英文名稱： WD重復膜蛋白19抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1A/P21 (Ser130) 磷酸化p21蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細胞介素-16抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DOK7 英文名稱： 接頭蛋白DOK7抗體 0.1ml

Anti-Phospho-Ack1(Tyr326) 磷酸化Ack1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human Beta-glucosidase ELISA Kit 人β葡糖苷酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-NIT2 NIT2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-15 白介素15抗體 規(guī)格 0.1ml

17-KS ELISA Kit 大鼠17-酮類固醇 96T

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716) 英文名稱： 磷酸化血小板源性生長因子受體B抗體 0.1ml

C8orf30A 英文名稱： 8號染色體開放閱讀框30a抗體 0.2ml

Anti-NIT2 NIT2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。