“ATP熒光法細菌總數(shù)快速檢測系統(tǒng)”簡稱“BL細菌快檢儀”,由試劑組、微量熒光檢測儀、樣品預處理耗材三部件組成。它是由本公司依據(jù)螢火蟲發(fā)光原理研制;經國家有關部門鑒定;關鍵試劑、組成部件均立足于國內;具有自主知識產權;與美、英、日同類產品性能相同,價格只及其一半的款國產細菌快檢設備??捎糜跈z測食品、飲料、原料乳中的細菌總數(shù),也可供上述生產企業(yè)及檢疫、環(huán)保、水政、海關等單位衛(wèi)生監(jiān)控使用,1-5分鐘即能提供實時檢測數(shù)據(jù),并具備準確、便攜、操作容易等特點。 螢火蟲會發(fā)光是由于它能合成將化學物質的化學能轉變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎?mdash;螢火蟲熒光素酶(簡稱蟲光素酶,luciferase)、蟲熒光素(D-luciferin)、以及所有細胞生物都產生的生物能量物質--三磷酸腺苷(ATP)。在有氧的條件下,蟲光素酶催化蟲熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應形成氧化熒光素并發(fā)出熒光, 只要具備適當條件,不僅螢火蟲,即使在試管中也能發(fā)出熒光。在一個反應系統(tǒng)中,當蟲光素酶和蟲熒光素處于過量的情況下,熒光的強弱取決于ATP的數(shù)量。因此,以檢測含細菌的樣品為例,細菌細胞越多,ATP量越高,發(fā)出的熒光也就越強。由于蟲光素酶對ATP的反應非常靈敏,熒光強弱可以通過熒光儀計量。所以,在排除樣品中非細菌ATP的干擾情況下,通過熒光值就能確定樣品中細菌ATP的含量,通過相對熒光值和細菌細胞數(shù)的關系曲線,就能快速確定樣品中細菌的細胞數(shù)。 應用領域及優(yōu)特點 “快檢系統(tǒng)”可供食品、飲料、乳品加工生產的全程監(jiān)測,以及環(huán)保、水政、海關檢疫等執(zhí)法部門快速檢測各種樣品中的微生物(細菌總數(shù))。表1、2分別列出使用“快檢系統(tǒng)” 實施全程監(jiān)控過程及“快檢系統(tǒng)”和“常規(guī)平皿計數(shù)”方法的差別和利弊。 ATP熒光法細菌總數(shù)快速檢測系統(tǒng)技術指標 序號 | 項目名稱 | 標 準 | 1 | 檢測特性 | 分度裂解及0.45μm過濾,去除非細菌細胞的干擾 | 2 | 實際檢測靈敏度(菌落數(shù)) | 100cfu/ml(1cfu/ml使用濃縮器) | 3 | 量程范圍 | 0--1010cfu/ml | 4 | 實際檢測靈敏度(ATP) | 5×10-18mol | 5 | 本底計數(shù)率(s-1) | ≤50 | 6 | 與平皿計數(shù)相關性 | 98% | 7 | 8小時工作不穩(wěn)定性 | ≤5% | 8 | 重復性(批間差) | ≤3% | 9 | 環(huán)境溫度 | 5-30℃ | 10 | 檢測器特性 | 光電倍增管及光子計數(shù)采樣模塊 | 11 | 供電電源 | ~220V 50Hz可使用充電電池 | 12 | 機身尺寸 | 160×105×50mm |
使用BL細菌快檢儀實施食品、飲料、乳品加工等全程衛(wèi)生學監(jiān)測 生產程序 | 監(jiān)測內容 | 加工生產前 | 生產設施清潔、消毒效果檢測,原、輔料細菌總數(shù)檢測,以保障原料質量或明確原料品質級別。 | 加工生產過程中 加工生產后 廢棄物排放、環(huán)境、人員 | 生產設備關鍵控制點(例如供水、通風閥門)衛(wèi)生學監(jiān)測,影響乳品發(fā)酵飲料、酒類特殊微生物總數(shù)檢測。 制成品污染細菌總數(shù)檢測。 衛(wèi)生學及細菌總數(shù)檢測。 |
兩種微生物(細菌總數(shù))檢測方法的差別和利弊比較 | ATP熒光快檢 | 常規(guī)平皿計數(shù) | 可檢范圍 獲得結果的時間 操作繁簡 結果的效應 | 所有細菌、真菌、藻類 1-5分鐘即得實時結果 簡單,步驟少 快速、預警、溯源 | 只能檢出可在特定培養(yǎng)基上生長的微生物(常用LB瓊脂皿只檢出需氧細菌) 需要多種特定培養(yǎng)基,需1-5天 煩瑣、步驟多、人為影響因素多 滯后、檢出結果保留時間長,有利于進一步化驗 |
故障排除 故障 | 可能原因 | 排除方法 | 在無過濾比色杯或樣品情況下,可拉動抽屜推入后,仍顯示高背景讀數(shù) | 1、抽屜被樣品污染 2、高濕度影響設備 3、光敏部件有誤 | 1、用酒精擦抽屜去除污染 2、重新使用前在干燥情況下放置24小時 3、更換或檢修測光儀 | 有樣品的可拉動抽屜推入后無讀數(shù) | 1、電池電量不足 2、直流電源接觸不良 3、斷電 4、可拉動抽屜關閉不嚴 | 1、如顯示電池電量不足,可更換電池或改用直流電源 2、檢查和改善接觸 3、查對供電情況 4、重新關閉抽屜 | 給出的讀數(shù)顯著低于應有讀數(shù) | 1、可拉動抽屜不干凈 2、濕度高 3、加入LLR試劑組后沒有立即關閉抽屜讀數(shù) 4、樣品經冷凍或冷藏后使其中的細菌細胞內ATP量顯著降低 | 1、擦凈可拉動抽屜 2、使用前在干燥情況下放置24小時 3、更換樣品,重新試驗讀數(shù) 4、待樣品及試劑恢復到室溫后再測定 |
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