上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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上海實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Taqman探針?lè)ǎ?/strong>
熒光定量PCR技術(shù)是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)***反應(yīng)過(guò)程。隨著PCR 反應(yīng)的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),收集一次熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,結(jié)合相應(yīng)的軟件對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析,可以得到熒光擴(kuò)增曲線,計(jì)算待測(cè)樣品初始模版的量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍,運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù),可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行相對(duì)定量、定量和定性分析。
上海實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Taqman探針?lè)ǎ?/strong>
服務(wù)項(xiàng)目:
1.相對(duì)定量:包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增,采用SYBR Green I法和TaqMan探針?lè)▋煞N方式,一般采用2-ΔΔ Ct法進(jìn)行計(jì)算。每個(gè)樣本重復(fù)三次,一般情況我公司提供內(nèi)參基因引物。
2.定量:需要制備標(biāo)準(zhǔn)品并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后檢測(cè)目的樣本中的基因,比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到基因準(zhǔn)確拷貝數(shù)。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
1. 使用定量PCR儀中穩(wěn)定和常用的ABI7900HT、ABI stepone /plus、Roche 480。
2. 核心試劑采用美國(guó)*KAPA試劑,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,重復(fù)性好。
3. 豐富的qPCR經(jīng)驗(yàn),基因類別有DNA、mRNA、miRNA;物種類別有人、鼠、雞、牧草、酵母菌、金黃色葡萄菌、病毒上清液等等。
送樣要求:
細(xì)胞(≥106 )、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、葉片(≥100mg)等樣品材料,基因組DNA或總RNA(體積≥30μl,濃度≥50 ng/μl)。
提交結(jié)果:
引物和探針及序列,反轉(zhuǎn)錄膠圖,原始數(shù)據(jù)(包括擴(kuò)增曲線和熔解曲線)、數(shù)據(jù)分析結(jié)果及實(shí)驗(yàn)報(bào)告。