上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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更新時間:2023-08-28 09:28:49瀏覽次數(shù):1021
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激光共聚焦制作
共聚焦顯微技術(shù)(Confocal microscopy)是通過激光掃描共聚焦顯微鏡來獲取細(xì)胞內(nèi)某個薄層面上的熒光信息, 并結(jié)合計算機自動控制和信息收集功能,對熒光信號的分布、強度和動態(tài)變化進行較好的的分析和整合, 從而得到豐富的細(xì)胞信息。
1.消除了聚焦平面以外的熒光信號的干擾, 故成像清晰
2.可以對樣品不同層面進行連續(xù)逐層掃描, 再由計算機將這些圖形重組為三維圖像,圖形清晰度高、層次分明、立體感更強
3.可對細(xì)胞某個選定結(jié)構(gòu)進行長度和體積的測量, 在分析細(xì)胞空間結(jié)構(gòu)和某些物質(zhì)的胞內(nèi)定位方面具有明顯的優(yōu)勢
4.可同時實現(xiàn)多重指標(biāo)的檢測。目前,該技術(shù)應(yīng)用范圍已擴展到細(xì)胞學(xué)、微生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、生理和病理學(xué)等學(xué)科,成為現(xiàn)代生物學(xué)微觀研究的重要工具
激光共聚焦制作
使用前請注意:
1.實驗設(shè)計前請了解儀器相關(guān)配置參數(shù),選擇合適的抗體或熒光染料等。我校共聚焦顯微鏡激光器波長分別為405nm、488nm、532nm、635nm。同時為了避免使用沖突,請?zhí)崆邦A(yù)約使用時間。
2.細(xì)胞樣品請用0.17mm的蓋玻片爬片或者用共聚焦培養(yǎng)皿培養(yǎng),組織樣品后用0.17mm蓋玻片封片;封片劑可用緩沖甘油或防淬滅劑等,對于活細(xì)胞,則可使其浸潤于相應(yīng)的溶液中,直接滴片和封片,立即觀察,不加上述封片劑。
3.為了獲得理想的圖像,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本不能太厚及太密,并且應(yīng)避免細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋。
4.為保持組織細(xì)胞的完整性和所要檢測物質(zhì)的抗原性,非活細(xì)胞觀察的樣品請盡量用固定劑固定樣品。
5.用前請用熒光顯微鏡確認(rèn)一下是否有熒光,條件摸索調(diào)整合適后再使用共聚焦顯微鏡。
使用時,注意以下幾點:
1.嚴(yán)格按照使用規(guī)程操作,不得改變操作程序,激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)中的激光器使用壽命有限且價格昂貴。所以,在操作過程中切記,在開關(guān)的啟動順序以及在掃描過程中努力做到快速有序,保護好激光器。
2.注意不要暴露在中等功率和高功率的激光輻射中,特別要注意不得注視激光束,甚至不要觀看樣品;不得在系統(tǒng)附近儲存或使用易燃易爆物的固體、液體或氣體;可以引燃的材料如布或紙張不得放入光路中。
3.掃描后的圖像儲存在計算機內(nèi),可作進一步處理。由于計算機的硬盤有限,應(yīng)及時儲存到用戶CD光盤上,為了防止病毒浸染,禁用U盤及移動硬盤等。
使用后注意:
及時用無水乙醇將油鏡鏡頭擦干凈,物鏡鏡頭調(diào)至低點,將顯微鏡周圍及房間清理干凈,后填寫使用記錄。