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參考價(jià) | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價(jià):¥2600 ~ ¥6000
更新時(shí)間:2024-02-28 19:55:33瀏覽次數(shù):161評價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號 | EY-XY4065 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 生長特性 | 懸浮生長 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 英文名稱 | cat spleen leukocyte |
種屬來源 | 貓 |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê唵?,?xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
貓脾臟白細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 貓脾臟白細(xì)胞 | 組織來源 | 脾臟 |
種屬 | 貓 | 生長特性 | 細(xì)胞為混合體系,大部分懸浮生長,小量貼壁生長 |
分離方法 | 通過密度梯度離心法獲得 | 英文名稱 | cat spleen leukocyte |
貨號 | EY-XY4065 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細(xì)胞鑒定:血涂片,Giemsa染色驗(yàn)證
支原體檢測:貓脾臟白細(xì)胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:貓脾臟白細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞代數(shù):第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
白細(xì)胞(英文名:leukocyte,white blood cell,簡稱:WBC),舊稱白血球。血液中的一類細(xì)胞。白細(xì)胞經(jīng)復(fù)合染料染色后,可根據(jù)其形態(tài)差異和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無的顆??煞至<?xì)胞和無粒細(xì)胞。無粒細(xì)胞又分為單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞兩種。血液中有三種類型的淋巴細(xì)胞:B細(xì)胞、T細(xì)胞和NK細(xì)胞。粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有嗜色顆粒,分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到,血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少。具有細(xì)胞核。白細(xì)胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體,在機(jī)體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面有重要作 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠W-10b蛋白(W10B)ELISA試劑盒 ,英文名: W10B ELISA Kit
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 96T/48T
人HSP60 IgM抗體免疫試劑盒 Human Hsp60 IgM aibody ELISA kit
英文名稱MouseFGF4ELISAKit小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子-4FGF4規(guī)格:96T/48T
冰凍切片半胱蛋白酶-6(CASPASE-6)活性原位熒光染色檢測試劑盒50次
Rat8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISA試劑盒大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human ai-pl7-aibody (ai-cailage-Ab) ELISA Kit 人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)ELISA試劑盒
HumanEndotheliallipase,ELELISAKit 人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACSELISAKit大鼠脂酰輔酶合成酶規(guī)格:48T/96T
亞甲基藍(lán)(METHYLENEBLUE)復(fù)染試劑盒50次
MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
貓脾臟白細(xì)胞英文名稱: Total Niic Oxide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NO
自然殺傷細(xì)胞 英文名稱: Natural killer Cells 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NK
桿菌抗體 英文名稱: Mycobacterium Tuberculosis Aibody 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TB
谷酰胺 英文名稱: ansglaminase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TG
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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