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參考價:¥2600 ~ ¥6000
更新時間:2024-02-22 12:17:01瀏覽次數(shù):224評價
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號 | EY-XY3542 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 組織來源 | 膽囊 |
種屬來源 | 大鼠 |
原代細胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性, 因此用于藥物實驗,尤其是藥物對細胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng),因為方法簡單,細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進行傳代培養(yǎng)。
大鼠膽囊上皮細胞
細胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠膽囊上皮細胞 | 組織來源 | 膽囊 |
種屬 | 大鼠 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 上皮細胞樣 | 英文名稱 | Gallbladder Epithelial Cells |
貨號 | EY-XY3542 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:細胞角蛋白19(CK-19)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠膽囊上皮細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
膽囊,是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造,有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。膽囊內(nèi)面以粘膜覆蓋,有發(fā)達的皺襞。膽囊收縮排空時,皺襞高大而分支;膽囊充盈時,皺襞減少變矮。粘膜上皮為單層柱狀,內(nèi)分散分部著少量杯狀細胞。膽囊粘膜細胞具有典型的吸收型細胞的特征,具有較強的吸收和濃縮功能,上皮細胞吸收膽汁中的水和無機鹽,經(jīng)細胞側(cè)面的質(zhì)膜轉(zhuǎn)運至上皮細胞間隙內(nèi),吸收的水和無機鹽通過基膜進入固有層的血管和淋巴管內(nèi)。同時,膽囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
嗅覺受體5F1抗體
植物鐵型亞鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
逆轉(zhuǎn)錄RT試劑盒
植物根瘤原生質(zhì)細胞分離試劑盒
細胞GSK-3BETA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
通用型羊Q熱(Q Fever)基因檢測試劑盒
通用型鈉離子(Na)濃度化學比色法定量檢測試劑盒
血濾紙片樣品半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒
氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)ELISA分析試劑盒
Helly 固著液
腸毒素B(Staphylococcus aureus : enterotoxin B)鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒
冰凍切片組織PDGF-A蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
食物D-半乳糖含量光譜法定量檢測試劑盒
冰凍切片組蛋白H3-K9甲基化免疫組化檢測試劑盒
組織JNK3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
血液抗凝液
脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白4重組兔單克隆抗體
睪丸酸性磷酸酶抗體
人血清抗體
LSM6蛋白抗體
細胞維甲酸結(jié)合蛋白1抗體
癌/睪丸抗原128抗體
淋巴細胞趨化因子抗體
大鼠膽囊上皮細胞B淋巴細胞基因1抗體
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細胞培養(yǎng)實驗)
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細胞直至上清清亮為止。