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          目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>人原代細(xì)胞>> 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)

          人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)
          • 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)
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          • 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)
          • 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)
          參考價2600-6000/件
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

          參考價:¥2600 ~ ¥6000

          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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          更新時間:2024-02-20 19:50:50瀏覽次數(shù):211評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5x105cells/T25或1mL凍存管
          貨號 EY-XY3308 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 生長特性 貼壁生長
          細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣 組織來源 肝臟組織
          種屬來源
          人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品:冰凍切片過氧化酶活性(pH7.2)染色試劑盒
          冰凍切片過氧化酶活性(pH7.2敏型)染色試劑盒
          冰凍切片過氧化酶活性(混合型)染色試劑盒
          全組織過氧化酶活性染色試劑盒
          細(xì)胞ATP酶活性染色試劑盒

          人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞

          細(xì)胞基本屬性:

          產(chǎn)品名稱

          人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)

          組織來源

          肝臟組織

          種屬

          生長特性

          貼壁生長

          形態(tài)特征

          內(nèi)皮細(xì)胞樣

          英文名稱

          Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells

          貨號

          EY-XY3308

          規(guī)格

          5x105cells/T25或1mL凍存管

          質(zhì)量檢測:人原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

          產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管

          培養(yǎng)基:人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

          培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

          換液頻率:每2-3天換液一次

          消化液:0.25%

           產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

          運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

          供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

          背景介紹:

          人原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝臟組織;肝竇內(nèi)皮細(xì)胞是肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中數(shù)目最多的細(xì)胞,約占肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的70%,在表型、功能上與普通毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有較大差異。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞之間缺乏細(xì)胞間連接,細(xì)胞下基底膜物質(zhì)很少,因此竇內(nèi)皮通透性較高,有利于調(diào)節(jié)物質(zhì)交換。不同于肝細(xì)胞的自我復(fù)制,肝再生時新生LSECs主要來自肝內(nèi)外其他細(xì)胞成分的分化替代,不少研究證實(shí)了肝再生時LSECs的骨髓源性替代。內(nèi)皮祖細(xì)胞是參與這一過程的主要細(xì)胞成分。






          原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):

          原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對細(xì)胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。

          (一)組織塊培養(yǎng)法

          許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê唵?,?xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。

          1. 設(shè)備材料

          培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

          2. 操作步驟

          (1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。

          (2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。

          (3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

          (4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。

          (5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。

          (6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。

          (7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。

          (9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          QQ截圖20240105153042.png

          操作方法:

          組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))

          材料與儀器

          【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;

          步驟

          1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          核苷酸腺苷轉(zhuǎn)移酶2抗體

          CLIAKitforCoxV-IgM(HumanCoxsackievirusIgM)ELISAKit人柯薩奇病毒IgM規(guī)格:48T/96T

          Ratplatelet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISAKit 大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          細(xì)胞胰腺脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

          Ratcomplexedprostatespecificaigen,cPSAELISAKit大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          大鼠補(bǔ)體C5a(C5a)ELISA試劑盒 ,英文名: C5a ELISA Kit

          難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

          HumanskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISA試劑盒人橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          ELISAKitCyclin-D1小鼠細(xì)胞周期素D1規(guī)格:48T/96T

          Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          UK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

          Sheep ierleukin 6 (IL-6) ELISA Kit 綿羊(IL-6)ELISA試劑盒

          Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          CLIAKitforHumanCailageglycoprotein39,HCgp-39ELISAKit人軟骨糖蛋白39規(guī)格:48T/96T

          細(xì)胞COT激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

          ELISAKitD1R大鼠多巴胺D1受體規(guī)格:48T/96T

          腫瘤抑制轉(zhuǎn)移候選基因3抗體

          過敏毒素C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體

          乳腺癌易感基因2相關(guān)蛋白抗體

          NADH復(fù)合體5抗體

          線粒體核糖體蛋白L4抗體

          半抗體

          磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體

          人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞)c-Myc應(yīng)答蛋白抗體


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