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傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

TFK1人膽管癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

phospho-GATA4 (Ser105)： 0酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體 TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0342H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )5×106cells/瓶×2 人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA 試劑盒 IgM/APC APC標記的小鼠抗人IgM 0.1ml

GATM： GATM蛋白抗體 C2C12, 小鼠肌原細胞 Mouse

HDBEC adult Pellet 人皮膚血管內(nèi)皮細胞團塊(成年捐獻者) > 1 mio.cells 間充質(zhì)干細胞軟骨細胞分化培養(yǎng)基MCDM-prf 人中性粒細胞堿性0酸酶(NAP)ELISA 試劑盒 IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗人IgM 0.1ml

GARB1： γ1基受體GABAA Rβ1抗體 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7

RWPE-2(人前列腺正常細胞) 5×106cells/瓶×2 CHRF(人巨核細胞白血病) 大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒 Pentosidine  大鼠戊糖素 96T

NFkB p105 / p50： 細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 人胰腺癌細胞;PANC-1

CF Protein Rat 重組大鼠 CF / Ciliary Neuroophic Factor 蛋白 大鼠髓樣細胞觸發(fā)性受體2(EM2)ELISA試劑盒 IL-13(Human Interleukin 13)  人白介素13 96T

Neurokinin A Receptor： 神經(jīng)A受體/K物質(zhì)受體抗體 SERPINB9 Others Human 人 SerpinB9 / CAP-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠直腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠髓細胞觸發(fā)受體1(EM1)ELISA試劑盒 ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin)  小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素 96T

TFK1人膽管癌細胞intestinal FABP/IFABP/FABP2： 腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 子宮平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽) 人白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 Mtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原 0.5mg

ING1： 生長抑制因子基因1抗體 B18R Others Vaccinia Virus 牛痘病毒 B18R / B19R 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人胎盤絨毛膜細胞培養(yǎng)基 100mL 人白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒 WIG-1(wtp53-induced gene 1) 野生型p53誘導基因1抗原 0.5mg

IL-8/CXCL8： 白介素8抗體 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B 人肝癌細胞，SK-HEP-1細胞 95-D(高轉(zhuǎn)移肺癌細胞)