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注意事項(xiàng):
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：異源曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣
英文名稱：Mannheimia varigenaPCR
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
異源曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
乙酸維生素E/維生素E醋酸酯/維生素E乙酸酯/[2R-[2R*(4R*,8R*)]]-3,4-二氫-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-*基三癸基)-2H-1-苯并呋喃-6-酚乙酸酯/ D-α-生育酚醋酸酯/α-生育酚乙酸酯/醋酸生育酚/維他命E醋酸鹽/Vitamin E acetateBR，98%100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，58-95-72～8℃，避光

維生素B1/鹽酸硫胺/鹽酸噻胺/硫胺鹽酸鹽/鹽酸硫胺素/維生素B1鹽酸鹽/尼克酸/VB10.9925克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，CAS:67-03-8RT，避光

維生素B2/核黃素/乳黃素/維酶素/7,8-二甲基-10-(1'-D-核糖基)-異咯嗪/維生素乙2/VB2BR，98%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，83-88-5RT，避光

5-核黃素磷酸鈉鹽/核黃素-5-磷酸鈉鹽/核黃素磷酸鈉/維生素B2磷酸鈉/黃素單核苷酸鈉/核黃素-5’-磷酸酯鈉/5’-磷酸核黃素鈉/核黃素-5'-(二氫磷酸酯)單鈉鹽/FMN-Na高純，73%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，130-40-5保存：-20℃

5-核黃素磷酸鈉鹽二水物/核黃素-5-磷酸鈉鹽二水物/核黃素磷酸鈉/維生素B2磷酸鈉二水物/黃素單核苷酸鈉二水物/核黃素-5’-磷酸酯鈉二水物/5’-磷酸核黃素鈉二水物/FMN-Na高純，73%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，6184-17-4保存：-20℃

維生素B3/煙酸/菸酸/3-吡啶羧酸/吡啶-3-羧酸/3-噼啉酸/吡啶-3-甲酸/3-吡啶羥酸/吡啶-3-羥酸/3-噼啉酸/尼克酸/尼古丁酸/氮苯酸-[3]/煙堿素/3-吡啶甲酸/VB3CP，99%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，59-67-6RT，避光

異煙酸/4-吡啶羧酸/吡啶-4-羧酸/4-吡啶羥酸/吡啶-4-羥酸/4-噼啉酸/4-吡啶甲酸/吡啶-4-甲酸/異尼克酸/COACP，98%100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，55-22-1RT，避光

維生素B5/D-泛酸鈣/本多生酸鈣/(R)-N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)-β-丙氨酸鈣/N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸鈣/右旋泛酸鈣/VB5BR，99%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，137-08-6RT，避光

維生素B6/鹽酸吡哆辛/鹽酸吡哆醇/鹽酸B6醇/鹽酸吡哆素/5-羥基-6-甲基-3,4-吡啶二甲醇鹽酸鹽/2-甲基-3-羥基-4,5-雙羥甲基吡啶鹽酸鹽/VB6BR，99%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，58-56-0RT，避光

維生素B12/維生素乙12/氰鈷胺/維他命B12/氰基鈷胺/鈷胺素/VB12BR，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，68-19-92～8℃，避光

磷酸吡哆醛/5-磷酸吡哆醛/吡多醛5-單磷酸酯/3-羥基-2-甲基-5-[(膦酰氧基)甲基]-4-吡啶甲醛一水合物/磷酸吡醛素/吡哆醛-5-磷酸酯/3-羥基-5-羥甲基-2-甲基異煙酰/輔脫羧酶/PLPBR，99%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，41468-25-12～8℃，避光

鹽酸吡哆醛/吡哆醛鹽酸鹽/鹽酸吡醛素/3-羥基-5-羥甲基-2-甲基-4-吡啶甲醛鹽酸鹽/3-羥基-5-羥甲基-2-甲基異煙酰醛鹽酸鹽/鹽酸維生素B6醛/2-甲基-3-羥基-4-甲酰-5-羥甲基吡啶鹽酸鹽/鹽酸3-羥基-5-(羥甲基)-2-甲基煙酰醛/Pyridoxal hydrochlorideBR，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，65-22-52～8℃，避光

鹽酸吡哆胺/吡哆鹽/吡胺素二/Pyridoxamine 2HCLBR，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，524-36-72～8℃，避光

煙酸肌醇酯/肌醇煙酸酯/肌醇六煙酸酯/煙肌酯/煙酸肌醇/煙鹼酸肌醇酯/Inositol niacinateBR，98%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，1700877RT
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