目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>信號(hào)系列>> 植物根系活力
參考價(jià) | 600 |
參考價(jià):¥ 600
40T
40T | 600元 | 30盒可售 |
更新時(shí)間:2023-11-05 20:37:58瀏覽次數(shù):677評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 40T |
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貨號(hào) | EY-01S1358 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅用于科研 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):植物根系活力
規(guī)格:40T
貨號(hào) : EY-01S1358
測(cè)試方法:可見(jiàn)分光光度法
分類(lèi):信號(hào)系列
商品詳情:
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
植物根系是活躍的吸收器官和合成器官,根的生長(zhǎng)情況和代謝水平即根系活力直接影響植物地上部的生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)狀況以及最終產(chǎn)量,是植物生長(zhǎng)的重要生理指標(biāo)之一。植物根系活力(根系脫氫酶活性)可以采用TTC還原、萘胺氧化和甲烯藍(lán)吸附等方法測(cè)定。根系能氧化萘胺生成紅色的萘胺化合物,根系對(duì)萘胺的氧化能力與其呼吸強(qiáng)度有密切聯(lián)系。
植物根系活力檢測(cè)試劑盒(萘胺比色法)檢測(cè)原理是在弱酸性條件下,以萘胺為底物,萘胺與對(duì)氨基苯磺酸、亞硝酸鹽作用生成穩(wěn)定的紅色偶氮化合物,可以根據(jù)根系表面著色深淺,通過(guò)分光光度計(jì)510nm檢測(cè)溶液中未被氧化的萘胺的量,以定量測(cè)定根系活力。
粗酶液提?。?br/>
1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。
2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測(cè)。
3、血清等液體:直接測(cè)定。
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。
3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽測(cè)定管=A1-A2。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、將試劑二在37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。
3、操作表:
試劑名稱(chēng)(μL) | 測(cè)定孔 |
樣本 | 20 |
試劑二 | 760 |
試劑三 | 10 |
試劑四 | 10 |
將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長(zhǎng)下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2,計(jì)算ΔA=A1-A2。
注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋?zhuān)笰1-A2小于0.5,可提高檢測(cè)靈敏度。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
NAD-MDH活力單位的計(jì)算:
1、血清(漿)NAD-MDH活力的計(jì)算
單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1 min;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;2000:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),2000萬(wàn)。
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