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          上海一研生物科技有限公司

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          蜥蜴甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒使用方法

          閱讀:557      發(fā)布時間:2022-8-4
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          蜥蜴甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒使用方法:

          測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

          1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

          12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

          6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

          3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

          1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

          2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|

          3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 

          4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

          5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

          6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

          7. 溫育:操作同3。

          8. 洗滌:操作同5。

          9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

          10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

          11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

          NA-Green (EB升級換代產(chǎn)品, 2000X)5ml

          Gel-Red (EB升級換代產(chǎn)品, 10000X)0.2ml

          Gel-Red (EB升級換代產(chǎn)品, 10000X)1ml

          Gel-Green (EB升級換代產(chǎn)品, 10000X)0.2ml

          Gel-Green (EB升級換代產(chǎn)品, 10000X)1ml

          Agarose50g

          TAE(50X)500ml

          DNA Ladder100次

          DNA Ladder(BeyoRed)100次

          一步法感受態(tài)細菌制備試劑盒200次

          超級感受態(tài)細菌制備試劑盒100次

          BL21甘油菌200μl

          DH5α甘油菌200μl

          Stbl3甘油菌200μl

          TG1 甘油菌200μl

          細菌凍存液50ml

          pUCm-T載體20次

          pGL6(報告基因質(zhì)粒)1μg

          pGL6-TA(報告基因質(zhì)粒)1μg

          pGL6-miR(報告基因質(zhì)粒)1μg

          pAP1-luc(報告基因質(zhì)粒)1μg

          pAP1-TA-luc(報告基因質(zhì)粒)1μg

          pARE-luc(報告基因質(zhì)粒)1μg


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