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細(xì)胞色素試劑盒的使用方法和注意事項(xiàng)

閱讀：1072 發(fā)布時(shí)間：2021-3-27

　　細(xì)胞色素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人細(xì)胞色素C（Cyt-C）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人細(xì)胞色素C（Cyt-C）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

　　細(xì)胞色素試劑盒的使用方法：

　　1、樣品處理：

　?、僖后w食品：取約30m1樣品置于燒杯中，加熱除去酒精或二氧化碳，備用。

　?、诠腆w食品：稱取搗碎的樣品約10克，置于燒杯中，加30m1水，搖勻后過濾，濾液備用。

　　2、測(cè)定：取一燒杯，加入處理后的樣品液10m1，加入檢測(cè)液A5滴，搖勻；用PH試紙沾取燒杯內(nèi)的液體檢查PH值是否在8-9之間，如未到，再滴入檢測(cè)液A調(diào)整到PH值在8-9之間，然后加檢測(cè)試棉B少許，令其浸入液體中，在90-100℃的水浴中加熱，1分鐘后攪拌試棉并將液體中的檢測(cè)試棉B取出，用清水漂洗試棉，如試棉染上的顏色不褪的為非食用色素。為便于判斷，可取檢測(cè)試棉B少許，用水浸濕后對(duì)比觀察。

　　細(xì)胞色素試劑盒的注意事項(xiàng)：

　　1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

　　2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

　　3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)。

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