在酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)中,靈敏度高是其主要優(yōu)點(diǎn)之一。而這其實(shí)也是和檢測(cè)樣本有些關(guān)聯(lián)的,如果待 測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。
試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
一般說來,診斷試劑的檢測(cè)范圍以ng/ml計(jì)。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白,范圍可隨樣本的類型而變化。所以實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法確定樣本是否在所購(gòu)試劑盒的范圍內(nèi),如果不在檢測(cè)范圍內(nèi),分兩種情況對(duì)待。
1. 如果樣本中目標(biāo)蛋白太低,需找相應(yīng)靈敏度更高的試劑盒來檢測(cè)或濃縮樣本;
2. 如果樣本中目標(biāo)蛋白太高,則需要進(jìn)一步稀釋后進(jìn)行檢測(cè)
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