青海發(fā)光桿菌實(shí)驗(yàn)試劑
采用T7• Tag Affinity Purification Kit
T7•Tag抗體瓊脂。B/W緩沖液：4.29mM Na2HPO4，1.47 mM KH2PO4，2.7 mM KCl， 0.137mM NaCl，1%吐溫-20，pH7.3 洗脫緩沖液: 0.1M檸檬酸，pH2.2. 中和緩沖液：2M Tris，pH10.4。 PEG 20000。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.100ml 含重組表達(dá)質(zhì)粒的菌體誘導(dǎo)后，離心5000g×5min，棄上清，收獲菌體，用10ml預(yù)冷的B/W緩沖液重懸。
2. 重懸液于冰上超聲處理，直至樣品不再粘稠，4℃離心 14000g×30min，取上清液，0.45μm膜抽濾后作為樣品液。
3. 將結(jié)合T7•Tag抗體的瓊脂充分懸起，平衡至室溫，裝入層析柱中。
4. B/W緩沖液平衡后樣品液過柱。
5. 10ml B/W緩沖液過柱，洗去未結(jié)合蛋白。
6. 用5ml洗脫緩沖液過柱，每次1ml，洗脫液用含150μl中和緩沖液的離心管收集，混勻后置于冰上，直接SDS-PAGE分析。
7. 將洗脫下來的蛋白放入透析袋中，雙蒸水透析24hr，中間換液數(shù)次。
8. 用PEG 20000濃縮蛋白。
青海發(fā)光桿菌注意事項(xiàng)
蛋白在過層析柱前，要0.45μm膜抽濾，否則幾次純化后，柱子中會有不溶物。
奇異變形桿菌 CMCC49005
副溶血弧菌 ATCC33847
大腸埃希菌 ATCC8099
金黃色葡萄球菌 ATCC6538
肺炎克雷伯肺炎亞種 ACCC10498
黏質(zhì)沙雷菌黏質(zhì)亞種 ACCC10119
弗氏枸櫞酸桿菌 ACCC10490
鄉(xiāng)間布丘氏菌 ACCC10477
蜂房哈弗尼菌 CGMCC1.2026
普通變形桿菌 CGMCC1.1527
無丙二酸鹽檸檬酸桿菌 CGMCC1.2020
痢疾志賀氏 CGMCC1.1869
青海發(fā)光桿菌
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
10
立即詢價(jià)
您提交后，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)