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分光色度儀的測(cè)試步驟演示案例
閱讀：2148發(fā)布時(shí)間：2015-12-8
一、原理
碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡黃棕色膠態(tài)化合物，其色度與氨氮含量成正比，通?？稍诓ㄩL(zhǎng)410 — 425nm 范圍內(nèi)測(cè)其吸光度，計(jì)算其含量。本法zui低檢出濃度為 0.025mg/L （光度法），測(cè)定上限為 2mg/L 。
二、儀器
1 ． 500mL 全玻璃蒸餾器 。
2 ． 50mL 具塞比色管。
3 ．分光光度計(jì)。
4 ． pH 計(jì)。
三、試劑
配制試劑用水均應(yīng)為無氨水。
1 ．無氨水：可用一般純水通過強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂或加硫酸和高錳酸鉀后，重蒸餾得到。
2． 1mol/L 氫氧化鈉溶液。
3． 吸收液：①硼酸溶液：稱取 20g 硼酸溶于水中，稀釋至 1L 。
② 0.01mol/L 硫酸溶液。
4 ．納氏試劑：稱取 16g 氫氧化鈉，溶于 50mL 水中，充分冷卻至室溫。
另稱取 7g 碘化鉀和碘化汞 (HgI2) 溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中。用水稀釋至 100mL ，貯于聚乙烯瓶中，密塞保存。
5 ．酒石酸鉀鈉溶液：稱取 50g 酒石酸鉀鈉 (KNaC4H4O6 · 4H2O) 溶于 100mL 水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至 100mL 。
6 ．銨標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取 3.819g 經(jīng) 100 ℃干燥過的氯化銨 (NH4Cl) 溶于水中，移入 1000mL 容量瓶中，稀釋至標(biāo)線。此溶液每毫升含 1.00mg 氨氮。
7 ．銨標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：移取 5.00mL 銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液于 500mL 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。此溶液每毫升含 0.010mg 氨氮。
四、測(cè)定步驟
1 ．水樣預(yù)處理：無色澄清的水樣可直接測(cè)定；色度、渾濁度較高和含干擾物質(zhì)較多的水樣，需經(jīng)過蒸餾或混凝沉淀等預(yù)處理步驟。
2 ．標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：吸取 0 、 0.50 、 1.00 、 3.00 、 5.00 、 7.00 和 10.0mL 銨標(biāo)準(zhǔn)使用液于 50mL 比色管中，加水至標(biāo)線，加 1.0mL 酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加 1.5mL 納氏試劑，混勻。放置10min 后，在波長(zhǎng) 420nm 處，用光程 10mm 比色皿，以水為參比，測(cè)定吸光度。
由測(cè)得的吸光度，減去零濃度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（ mg ）對(duì)校正吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3 ．水樣的測(cè)定：分取適量的水樣（使氨氮含量不超過 0.1mg ），加入 50mL 比色管中，稀釋至標(biāo)線，加 1.0mL 酒石酸鉀鈉溶液（經(jīng)蒸餾預(yù)處理過的水樣，水樣及標(biāo)準(zhǔn)管中均不加此試劑），混勻，加 1.5mL的納氏試劑，混勻，放置 10min 。
4 ．空白試驗(yàn)：以無氨水代替水樣，作全程序空白測(cè)定。
五、計(jì)算
由水樣測(cè)得的吸光度減去空白實(shí)驗(yàn)的吸光度后，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得氨氮含量（ mg ）。
氨氮 (N,mg/L)=m × 1000/V
式中： ——由校準(zhǔn)曲線查得樣品管的氨氮含量（ mg ）；
V ——水樣體積（ mL ）。
注意事項(xiàng)
1 、納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對(duì)顯色反應(yīng)的靈敏度有較大影響。靜置后生成的沉淀應(yīng)除去。
2 、濾紙中常含痕量銨鹽，使用時(shí)注意用無氨水洗滌。所用玻璃器皿應(yīng)避免實(shí)驗(yàn)室空氣中氨的沾污。
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