詳細介紹
QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for CHO cells
QCdetect™ 殘留DNA檢測試劑盒,CHO細胞用
本產(chǎn)品是使用qPCR法(探針法)定量CHO細胞來源基因組DNA的試劑盒。
推薦用于抗體藥物及其生產(chǎn)工藝中的殘留DNA檢測。
◆特點
● 檢測下限:≥0.0003 pg/test
● 定量下限:≥0.003 pg/test
● 高線性的標準曲線
● 批次間差異小,再現(xiàn)性高
● 使用預混合緩沖液,操作簡單
● 不易受樣品所含雜質(zhì)的影響
● 含Internal Control(內(nèi)標)
◆檢測波長
● CHO gDNA 520 nm(例:FAM)
● Internal Control 555 nm(例:HEX)
※Internal Control為非天然的合成DNA。
◆試劑盒組成
1×PCR Master Mix——2×1 mL
DNA Dilution Buffer (DDB) ——1×10 mL
CHO Control DNA——1×40 μL
◆應(yīng)用實例
標準曲線
使用本產(chǎn)品對0.0003 pg~30,000 pg范圍內(nèi)的CHO gDNA進行qPCR檢測,并制備標準曲線(n=3)。
即使是0.0003 pg~30,000 pg這一大范圍的濃度內(nèi),也能獲得高線性的標準曲線。 |
pg/well | 0.0003 | 0.003 | 0.03 | 0.3 | 3 | 30 | 300 | 3000 | 30000 |
Ct | 37.639 | 34.822 | 31.546 | 28.117 | 24.809 | 21.337 | 18.079 | 14.726 | 11.506 |
37.107 | 34.981 | 31.506 | 28.324 | 24.906 | 21.416 | 18.084 | 14.744 | 11.467 | |
37.642 | 34.689 | 31.595 | 28.267 | 24.987 | 21.533 | 18.225 | 14.807 | 11.269 | |
Average Ct | 37.462 | 34.83 | 31.549 | 28.236 | 24.901 | 21.428 | 18.129 | 14.759 | 11.414 |
S.E | 0.30806 | 0.14652 | 0.04455 | 0.10713 | 0.08904 | 0.09853 | 0.0831 | 0.0424 | 0.12685 |
DNA片段的檢測
為了測試該產(chǎn)品能否檢測CHO細胞的片段gDNA,通過超聲處理使CHO gDNA片段化,并使用本試劑盒進行檢測。
即使是檢測片段gDNA,與檢測完整gDNA相比,也有著相同的檢測靈敏度。此外,低濃度的gDNA中也沒有發(fā)現(xiàn)靈敏度的下降。 |
高濃度蛋白樣品的應(yīng)用示例 —配合使用殘留DNA提取/試劑盒(碘/化鈉法)—
向含有高濃度γ-球蛋白的樣品中添加CHO gDNA,使用殘留DNA提取/試劑盒(碘/化鈉法)提取DNA。然后,使用本產(chǎn)品定量所得DNA,計算加標回收率。
樣品組成 ● 20 mg/mL γ-球蛋白 ● 3%甘/露醇 ● 2%蔗糖 ● 10 mM L-精/氨酸 ● 0.01% Tween20 | 添加的CHO gDNA濃度 10 ng/mL 1 ng/mL 100 pg/mL |
結(jié)果顯示,即使是含有高濃度蛋白的樣品,CHO gDNA也有著高回收率。 |
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
294-85201 | QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for CHO cells QCdetect™ 殘留DNA檢測試劑盒,CHO細胞用 | 100 tests |
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產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
292-81101 | DNA Extractor® Kit for Residual DNA, CP Method (Sodium Iodide Method) 殘留DNA提取/試劑盒(碘/化鈉法) | 50 tests |
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